[发明专利]一种GLP-1类似物生物活性的检测方法在审
申请号: | 201810433076.1 | 申请日: | 2018-05-08 |
公开(公告)号: | CN110452952A | 公开(公告)日: | 2019-11-15 |
发明(设计)人: | 谢灿;马利;冯艳;徐军;高相雷;李晓平 | 申请(专利权)人: | 广东东阳光药业有限公司 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 523808广东省东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,具体涉及GLP‑1类似物生物活性的检测方法,尤其是利拉鲁肽和杜拉鲁肽生物活性的检测方法。本发明通过用细胞培养基稀释细胞HEK293/GLP1R,用含磷酸二酯酶抑制剂的溶液稀释对照品和供试品,再用试剂盒检测刺激后细胞内cAMP水平变化,用多功能酶标仪进行读数测定,最后用统计软件拟合实验数据,通过公式计算得供试品的生物活性。该方法较之前的试剂盒检测方法更为准确、快速,且重复性更高,故符合生物制品生物学活性测定方法的要求。 | ||
搜索关键词: | 生物活性 试剂盒检测 供试品 生物学活性测定 多功能酶标仪 生物技术领域 细胞培养基 细胞 公式计算 利拉鲁肽 酶抑制剂 溶液稀释 实验数据 水平变化 统计软件 对照品 含磷酸 类似物 生物制品 检测 二酯 拟合 稀释 刺激 | ||
【主权项】:
1.一种GLP-1类似物生物活性检测方法,包括使用cAMP检测试剂盒,其特征在于所述方法为以下步骤:/n(1)用完全培养基稀释细胞,所述完全培养基中含8%-12%FBS;/n(2)用含磷酸二酯酶抑制剂的稀释缓冲液配制GLP-1类似物对照品溶液和供试品溶液;/n(3)将步骤(1)稀释后的细胞加入各孔板中,然后在不同孔板中分别加入步骤(2)配制的对照品溶液和供试品溶液,在37℃下进行孵育;/n(4)用cAMP试剂盒检测GLP-1类似物刺激后细胞内cAMP水平变化,用酶标仪进行检测读数;/n(5)计算生物活性。/n
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