[发明专利]一种发酵酱类中酪胺含量的检测方法

摘要

本发明提供了一种发酵酱类中酪胺含量的检测方法，属于食品分析技术领域。所述方法为UPLC方法，使用Waters AcquityⅠclass超高效液相色谱仪，C18柱。本发明方法样品用量少，时间短，方法线性良好，操作简单，重现性好，准确度高。

主权项

1.一种发酵酱类中酪胺含量的检测方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)标准溶液的制备：精密称取酪胺用0.1M盐酸配成浓度为1.0mg·mL‑1的溶液，微孔滤膜0.22μm过滤4℃保存备用。使用的梯度标准工作溶液用0.1M盐酸稀释到所需浓度。精密称取内标用去离子水配制成浓度为10μg·mL‑1的溶液，微孔滤膜0.22μm过滤后4℃保存备用。(2)样品溶液的制备：发酵酱类加三氯乙酸用匀浆机匀浆2.0min后，离心机上4000rpm离心10.0min，沉淀2次加三氯乙酸匀浆离心后，合并上清液用三氯乙酸定容，提取液用微孔滤膜0.22μm过滤后4℃保存备用。(3)衍生化反应：取标准溶液或样品100μl，加10μg·mL‑1内标溶液100μl，分别加用氢氧化钠调整pH值为10的饱和碳酸氢钠100μl和用丙酮配制的2.0‑5.0mg·mL‑1丹磺酰氯200μl，在50‑60℃下避光反应10.0‑20.0min。结束后加氨水100μl终止反应20.0‑30.0min。加乙腈定容到1.0mL。微孔滤膜0.22μm过滤后上柱检测。(4)检测：采用Waters AcquityⅠclass超高效液相色谱仪，C18，2.1×50mm，1.7μm色谱柱，流动相为去离子水和乙腈，流速0.3mL·min‑1，紫外检测波长254nm，进样量10μL，柱温55℃，流动相A为乙腈，流动相B为水，检测器：PDA检测器。采用内标法以目标分析物峰面积和内标峰面积的比值进行定量计算样品中酪胺的含量。