[发明专利]用于组氨酸标签蛋白纯化的纳米二氧化硅颗粒及其制备方法在审
申请号: | 201810467980.4 | 申请日: | 2018-05-16 |
公开(公告)号: | CN110498419A | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 杨成丽;杨帆;孙立恒;穆瑶;曾巧西;李大力 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | C01B33/18 | 分类号: | C01B33/18;B82Y30/00;C07K1/22 |
代理公司: | 32203 南京理工大学专利中心 | 代理人: | 刘海霞<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于组氨酸标签蛋白纯化的纳米二氧化硅颗粒及其制备方法。所述方法先将纳米SiO2表面氨基化后再醛基化,连接上金属螯合基团后,用氰基硼氢化钠还原碳氮双键,增强金属螯合基团与纳米SiO2连接稳定性。本发明制备的纳米二氧化硅颗粒作为纯化组氨酸标签蛋白的亲和分离材料,使蛋白分离纯化操作简单易行、成本降低。 | ||
搜索关键词: | 纳米二氧化硅颗粒 组氨酸标签蛋白 金属螯合基团 制备 亲和分离材料 氰基硼氢化钠 表面氨基化 连接稳定性 蛋白分离 氮双键 还原碳 醛基化 | ||
【主权项】:
1.用于组氨酸标签蛋白纯化的纳米二氧化硅颗粒的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:/n步骤1,将纳米二氧化硅颗粒超声分散在乙醇中,加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷,常温搅拌,离心,得到氨基化的纳米二氧化硅颗粒;/n步骤2,将氨基化的纳米二氧化硅颗粒用磷酸盐缓冲液洗涤除去未反应的3-氨基丙基三乙氧基硅烷,超声分散在磷酸盐缓冲液中,加入戊二醛溶液,常温搅拌,反应结束后,磷酸盐缓冲液洗涤,离心,得到醛基化的纳米二氧化硅颗粒;/n步骤3,醛基化的纳米二氧化硅颗粒用磷酸盐缓冲液重新悬浮,加入含亚氨基二乙酸的4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸溶液,常温搅拌,用Tris-HCl缓冲液洗涤和重新悬浮,加入氰基硼氢化钠溶液,常温搅拌,离心,Tris-HCl缓冲液洗涤,得到用于组氨酸标签蛋白纯化的纳米二氧化硅颗粒。/n
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