[发明专利]当归饮片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

摘要

本发明公开了一种当归饮片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，涉及中药材的指纹图谱技术领域，该方法包括供试品溶液的制备和高效液相色谱检测条件，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得当归饮片的指纹图谱；将色谱数据导入SPSS19.0版软件进行聚类分析，得标准化自制饮片与市售饮片的聚类结果。本发明的积极效果是：本发明建立了当归饮片HPLC指纹图谱的共有模式，标定了29个共有峰，能有效的表征其质量，克服了原质量控制方法的单一性，具有较高的应用价值。

主权项

1.一种当归饮片指纹图谱的建立的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取当归饮片粉末约0.5g，过三号筛精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入5％甲酸甲醇25mL，称定重量，超声处理，超声功率为250W，频率为40kHz，30min，取出，放冷，补足失重，摇匀，取续滤液，作为供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：称取适量阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、藁本内酯、正丁基苯酞、丁烯基苯酞对照品，精密称定，加乙腈制成质量浓度分别为0.06mg/mL、0.19mg/mL、0.12mg/mL、0.52mg/mL、0.87mg/mL、0.28mg/mL、0.61mg/mL的混合对照品溶液，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；(3)高效液相色谱测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10Lμ注入液相色谱仪，记录65分钟内的色谱图；其中，高效液相色谱测定的色谱条件为：采用WatersC18色谱柱，4.6×250mm，5μm，流动相：乙腈‑0.5％醋酸水，采用梯度洗脱方式：0～25min，5％～45％A；25～35min，45％～55％；35～45min，55％A；45～55min，55％～95％；55～60min，95％A；60～65min，95％～5％A；检测波长：254nm；柱温：30℃；流速：1mL/min；进样量：10μL，分析时间：65min。(4)供试品指纹图谱进行相似度评价：将多批当归饮片色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012.130723版本》软件，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得当归饮片的指纹图谱，比较待测样品的色谱图和标准指纹图谱相似度；(5)聚类分析：将待测样品29个共有峰的峰面积导入19.0版软件进行聚类分析，得标准化自制饮片与市售饮片的聚类结果。