[发明专利]靶向还原敏感共载化疗药物与P-gp耐药逆转剂的纳米递送系统的制备方法

摘要

本发明涉及一种靶向还原敏感共载化疗药物与P‑gp耐药逆转剂的纳米递送系统的制备方法。采用具有还原敏感性两亲性共聚物PCL7500‑ss‑PEG7500‑ss‑PCL7500构建具有还原敏感性的聚合物囊泡，通过分子间疏水作用力包载疏水性药物紫杉醇和Tariquidar，并采用pH梯度法在其亲水内腔载入阿霉素，叶酸靶向基团通过共价键修饰于囊泡表面，从而构建了具有靶向、还原响应、化疗协同作用的聚合物囊泡。小分子P糖蛋白（P‑gp）抑制剂Tariquidar通过阻断P‑gp对底物的外排作用来减少耐药细胞的药物抵抗，增加了耐药细胞对药物的摄取，从而逆转多药耐药。本发明的纳米递送载体能够同时包载疏水性化疗药物和亲水性化疗药物，具有肿瘤靶向且对肿瘤微环境具有还原响应性，可实现逆转肿瘤的多药耐药杀伤肿瘤。

主权项

1.一种靶向还原敏感共载化疗药物与P‑gp耐药逆转剂的纳米递送系统的制备方法，其特征在于包括的步骤：1）将两亲性共聚物PCL‑ss‑PEG‑ss‑PCL、0.2%‑5% (wt) DSPE‑PEG (2000) Folate、4%‑5% (wt) P‑gp耐药逆转剂与疏水性化疗药物充分溶于二氯甲烷或甲醇与二氯甲烷（体积比为1:1）的混合有机溶剂中，用旋转蒸发仪除去有机溶剂，使之在反应器内壁形成一层均匀的薄膜，真空干燥12‑20小时；2）上述薄膜样品分散于5 mL的 150‑300 mM硫酸铵溶液中，60‑65℃下水化 5 h；混匀，放置至室温，冰浴下超声30 min，得到稳定、均匀的载药还原敏感聚合物囊泡分散液；3）将聚合物囊泡悬液置于处理好的截留分子量为MWCO8000‑14000 Da的透析袋中，在蔗糖溶液中透析20 h，其中，该蔗糖溶液为102.69 g 蔗糖+1.152 g组氨酸溶于 1 L 水；4）亲水性化疗药物载入：将5.0 mg 阿霉素加入到上述透析后的样品中，60‑65℃恒温磁力搅拌下300 r/min，孵育1‑2 h；5）去除未包载药物：用pH7.4 PBS 透析 20 h后4℃保存，得到靶向肿瘤的共载化疗药物与P‑gp抑制剂的还原响应聚合物囊泡分散液。