[发明专利]一种利用超分辨成像检测端粒酶活性的方法在审
| 申请号： | 201810490109.6 | 申请日： | 2018-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN108642139A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 宗慎飞;宗君珠;王著元;崔一平 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6834 | 分类号： | C12Q1/6834;C12Q1/48;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 叶涓涓 |
| 地址： | 211189 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种端粒酶活性检测方法，包括：利用CHAPS法提取待测细胞中的端粒酶；利用捕获探针和端粒酶进行延伸反应，反应产物与信号探针溶液进行杂交反应；用超分辨成像技术对杂交反应产物进行检测。本发明采用超分辨成像技术能够检测到低浓度端粒酶形成的微弱信号，实现了更高灵敏度的端粒酶活性检测；采用Cy5染料修饰的端粒互补序列DNA作为信号探针，获得更高分辨率的图像及更低的检测限；避免了PCR反应过程以及信号扩增过程，大大简化了端粒酶活性检测步骤，同时也提高了检测结果的可靠性。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 超分辨成像 端粒酶活性 端粒酶 信号探针 杂交反应 捕获探针 高分辨率 高灵敏度 互补序列 检测结果 微弱信号 信号扩增 延伸反应 检测端 酶活性 染料 端粒 修饰 图像 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种利用超分辨成像检测端粒酶活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步，利用CHAPS法提取待测细胞中的端粒酶；第二步，利用捕获探针和端粒酶进行延伸反应，反应产物与信号探针溶液进行杂交反应；所述的捕获探针为掺杂染料的二氧化硅纳米球表面修饰端粒酶底物；所述的信号探针为修饰了染料分子的端粒互补序列；第三步，用超分辨成像技术对杂交反应产物进行检测，根据获得的两个通道的图像上点的重合情况以及DNA探针的荧光信号所获得的图像上点的大小判断端粒酶的活性。
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