[发明专利]一种固定化L-天冬氨酸α脱羧酶的方法及生产β-丙氨酸的方法

摘要

本发明涉及一种固定化L‑天冬氨酸α脱羧酶的方法。所述方法步骤如下：配置L‑天冬氨酸α脱羧酶缓冲溶液，活化树脂交联固化，得固定化L‑天冬氨酸α脱羧酶。本发明还涉及一种生产β‑丙氨酸的方法，采用固定化L‑天冬氨酸α脱羧酶为酶源制备而得。通过利用本发明获得的固定化酶进行生产获得的产物纯度高，容易分离；因此本发明在β‑丙氨酸的工业化生产领域具有良好的产业化前景。

主权项

1.一种固定化L‑天冬氨酸α脱羧酶的方法，其特征在于，所述方法步骤如下：①配置L‑天冬氨酸α脱羧酶缓冲溶液：将活性1000U/g～10000U/g的L‑天冬氨酸α脱羧酶用质量浓度为0.1mol/L的磷酸缓冲液溶解，再溶解温度为4～10℃，制备出L‑天冬氨酸α脱羧酶缓冲溶液；所述L‑天冬氨酸α脱羧酶缓冲溶液中L‑天冬氨酸α脱羧酶活力为50U/mL；②交联固化：将活化树脂置于反应器中，温度保持在0～10℃条件下，加入L‑天冬氨酸α脱羧酶缓冲溶液，在搅拌下处理30～60min；待活化树脂充分吸附酶并牢固结合后，加入戊二醛溶液，室温下搅拌1～2h，过滤收集固定化酶，用10倍体积的去离子水洗涤3次，得固定化L‑天冬氨酸α脱羧酶树脂；在‑80℃条件下冷冻干燥24h，4℃冰箱保藏备用；所述活化树脂的质量与L‑天冬氨酸α脱羧酶缓冲溶液的体积比为1g:(50～100)ml；活化树脂的质量与戊二醛溶液的体积比为1g:(5～10)ml。