[发明专利]一种荧光标记大分子季铵盐及其制备方法与应用

摘要

本发明公开一种荧光标记大分子季铵盐及其制备方法与应用。本发明将荧光素直接改性，将其分子上的羟基与氯乙酰氯进行酯化反应使得荧光素分子带有氯原子，为后续在大分子上季铵化使大分子含有荧光基团做好准备。本发明的合成过程优化了将荧光素引入大分子季铵盐的合成过程。与此同时，连接了氯原子的改性荧光素不仅是作为荧光标记的作用，在其季铵化后，还能提供水溶性和正电荷以利于大分子季铵盐在水中分散并且通过静电吸附于真菌表面从而达到抑菌的作用。本发明可以在紫外光条件下，以肉眼可见的状态直接观察到大分子季铵盐在病原真菌的菌核表面及其内部的分布，有利于研究大分子季铵盐在病原真菌中的抑制机理。

主权项

1.一种荧光标记大分子季铵盐的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)改性荧光素的合成：在有机溶剂A中加入荧光素，然后在惰性气体气氛中加入氯乙酰氯进行反应，反应结束，经产物纯化，得到改性的荧光素；(2)荧光标记大分子季铵盐的制备：将大分子物质和改性荧光素溶于有机溶剂B，在惰性气体气氛中反应；再加入氯化苄，在惰性气体气氛中反应，反应结束，经产物纯化，得到荧光标记的大分子季铵盐；所述的大分子物质为硅氧烷与甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的两嵌段共聚物、聚二甲氨基丙基甲基丙烯酰胺或十二烷基二甲基叔胺；所述的硅氧烷与甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的两嵌段共聚物通过如下步骤制备得到：1)乙烯基封端的聚二甲基硅氧烷聚合物的合成：在有机溶剂C中加入六甲基环三硅氧烷，在惰性气体气氛中，以正丁基锂引发聚合反应，最后加入二甲基乙烯基氯硅烷终止聚合反应；对反应得到的产物纯化，得到透明油状液体产物，为乙烯基封端的聚二甲基硅氧烷；2)羟基封端的聚二甲基硅氧烷的合成：将有机溶剂D、巯基乙醇、步骤1)得到的乙烯基封端的聚二甲基硅氧烷和催化剂混合，得到澄清的溶液，用紫外光引发自由基加成反应，对反应得到的产物纯化，得到羟基封端的聚二甲基硅氧烷；3)端基带溴的聚二甲基硅氧烷合成：在有机溶剂E中加入步骤2)得到的羟基封端的聚二甲基硅氧烷、三乙胺和2‑溴异丁酰溴混合反应；对反应得到的产物纯化，得到端基带溴的聚二甲基硅氧烷；4)聚硅氧烷和聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯两嵌段共聚物的合成：将有机溶剂F、步骤3)得到的端基带溴的聚二甲基硅氧烷、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、CuBr和(N,N,N',N”,N”)‑五甲基二乙烯基三胺混合，在惰性气体气氛中经行聚合反应，对反应得到的产物纯化，得到淡黄色粘稠液体产物，即硅氧烷与甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的两嵌段共聚物。