[发明专利]一种利用穗花狐尾藻内生菌溶解低品位磷矿粉的方法

摘要

本发明公开了一种利用穗花狐尾藻内生菌溶解低品位磷矿粉的方法，涉及磷矿开采加工技术领域，先将穗花狐尾藻内生菌分离，再筛选、扩繁，得到高活性溶磷内生菌，再将内生菌与培养基、低品位磷矿粉混合培养，利用穗花狐尾藻内生菌分泌的有机酸、酶等物质将不溶性磷转化为可溶性磷。本发明能源消耗低，溶磷效果优良，不产生污染环境的废气，极具实用价值。

主权项

1.一种利用穗花狐尾藻内生菌溶解低品位磷矿粉的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）内生菌的分离筛选：a、穗花狐尾藻内生菌分离：在野外采集植株完整、生长健壮的的穗花狐尾藻，用自来水冲洗干净，然后再用无菌水冲洗8‑10次，用无菌滤纸将其吸干，依次用70%乙醇溶液浸泡3‑5min、0.8%‑1.2%的次氯酸钠溶液浸泡2‑3min、0.1%氯化汞溶液中浸泡1‑2min，最后用无菌水再反复冲洗8‑10次并吸干，将植株剪切成0.8‑1.5cm的小段，纵向切开，将切面贴合在牛肉膏蛋白胨固体培养基表面上，将制备完的平板置于25℃恒温培养箱中培养1‑2周得到菌体；b、穗花狐尾藻内生菌筛选：在无菌条件下，选择步骤a中长势良好、外观完整的菌落，用灭菌的接种环挑出，在牛肉膏蛋白胨固体培养基制作的平板中横向划3‑4条直线，纵向划3‑4条直线，盖上玻璃盖，在25℃下培养，直至平板中菌落形成，挑选长势良好、完整的菌落，重复划线操作，再次培养形成菌落，得到纯化内生菌;穗花狐尾藻内生菌的扩繁：在无菌条件下，将经纯化的内生菌用灭菌的刀片刮下，与缓冲液混合，得到原始菌液；将原始菌液接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，培养7‑10天，得到穗花狐尾藻内生菌液；内生菌溶解低品位磷矿粉：将穗花狐尾藻干燥，研磨，过80目筛，得到穗花狐尾藻粉;按质量比取葡萄糖10‑12、(NH4)2SO40.3‑0.8、NaCl0.2‑0.5、KCl0.1‑0.3、MgSO4·7H2O0.2‑0.4、FeSO4·7H2O0.02‑0.04、MnSO4·7H2O0.04‑0.06、水950‑980混合，调pH=7.1，100‑130℃灭菌得到培养基;c、将低品位磷矿粉、穗花狐尾藻粉、培养基混合，在120‑160r·min－1、25℃下培养15‑18天，得到可溶性磷。