[发明专利]一种利用内置式超声波高效富集基质血管片段细胞材料的制备方法

摘要

本发明属于再生医学技术领域，公开了一种利用内置式超声波高效富集基质血管片段细胞材料的制备方法，包括离心、超声波破碎、离心收集等步骤。本发明所述制备方法利用超声波破碎脂肪组织中大部分成熟脂肪细胞，同时应用絮状离心沉淀技术，将破碎成熟脂肪细胞产生的油滴汇聚出去，从而达到富集SVFs的效果；且经过超声波处理后，细胞活性大幅度提高、细胞凋亡率大幅度下降，从而使得移植的有效性得到很大提高。由本发明方法制备得到的细胞材料可用于自体移植干细胞疗法，降低了脂肪移植的并发症，提高了移植脂肪的存活率，具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种利用内置式超声波高效富集基质血管片段细胞材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.将脂肪组织于1000～10000rpm条件下离心1～5min，离心后若分为三层，分别为顶层油脂、中间层混合物和底层肿胀液，则弃去底层肿胀液，过滤去除顶层油脂并取滤液；若不分层或分层不明显，则重复此步骤；S2.将S1所得滤液超声破碎，超声破碎条件为10～200W、1～300s、20～38℃；S3.将经S2超声破碎后的脂肪混合物于1000～10000rpm条件下离心3～10min；S4.经S3离心后，若脂肪混合物分为三层，分别为顶层油脂、中间层混合物和底层肿胀液，且油脂层体积占脂肪混合物总体积60%以上，则弃去顶层油脂，取中间层混合物，加等体积生理盐水混匀，于4000～10000rpm条件下离心3～8min；取离心沉淀，加入与中间混合物等体积的生理盐水重悬细胞，即得含有高度浓缩的基质血管片段细胞材料；若脂肪混合物不分层或分层不明显，则重复S2～S3。