[发明专利]基于外周血游离核苷酸miRNAs超灵敏检测装置的试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及基于外周血游离核苷酸miRNAs超灵敏检测装置的试剂盒及其检测方法，试剂盒含有1)微阵列检测池；2)外接磁场；3)预混合反应液A和4)预混合反应液B，检测多个待测靶标物时，平行配置分别对应检测一种待测靶标物预混合反应液A，分别记为预混合反应液A1、预混合反应液A2；该试剂盒明结合生物分子诊断、纳磁微球富集及生物芯片技术，发展一种新型无需扩增、高灵敏度、高通量直接准确检测与恶性肿瘤的发生、发展及耐药高度相关的外周血miRNAs的技术方法。本发明将在医学肿瘤无创检测、个体化用药及化疗预后生存等方面具有重要价值。

主权项

1.一种基于外周血游离核苷酸miRNAs超灵敏检测装置的试剂盒，其特征在于，包括：1）微阵列检测池、2）与检测池底部结构匹配的外接磁力板、3）预混合反应液A、4）预混合反应液B；所述预混合液A为与纳米磁珠经过基团偶联的多环链接荧光发夹探针；所述预混合反应液B为TNE缓冲液，由Tris、EDTA、NaCl组成，缓冲液pH为8.0；所述荧光发夹探针为与miRNA‑150特异性结合的双环连接的探针，探针序列如下：D1：FAM‑cgcgattctcccaacccttgtaccagtgatcgcgtgagcacatgaaatacactggagaatcg‑BHQ1（SEQ ID NO.1）D2：FAM‑atgcgctctcccaacccttgtaccagtggcgcatcgattctccagtgtacaatcccacagtg‑NH2（SEQ ID NO.2）D3：cactgtgggattgtatttcatgtgctca‑BHQ1（SEQ ID NO.3）。