[发明专利]用于核苷酸序列修饰的组合物、方法与应用

摘要

本发明公开了用于核苷酸序列修饰的组合物、方法与应用，涉及基因编辑技术领域。该组合物包括第一载体和第二载体,第一载体包括5’‑3’的式(I)结构:PII‑X1‑L1‑X2‑PolyA；第二载体包括5’‑3’的式(II)结构：PIII‑Y1‑PII‑Y2‑L2‑Y3或Y4或Y5‑L3‑Y4‑PolyA；该组合物可对靶序列上的更宽的位置上的碱基进行修饰，具有较广阔的核苷酸修饰空间。

主权项

1.一种用于核苷酸序列修饰的组合物，其特征在于，其包括：第一载体和第二载体；其中，所述第一载体包括5’‑3’的式(I)结构：PII‑X1‑L1‑X2‑PolyA   式(I)；式(I)中，PII为II型启动子；X1为突变型Cas9(D10A)核酸酶的编码序列；X2为多肽表位的编码序列，L1为无或连接序列；各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列；其中，所述第二载体包括5’‑3’的式(II)结构：PIII‑Y1‑PII‑Y2‑L2‑Y3或Y4或Y5‑L3‑Y6‑PolyA   式(II)；式(II)中，PIII为III型启动子；Y1为sgRNA的骨架序列；PII为II型启动子；Y2为多肽表位的单链抗体结合域的编码序列；L2为无或连接序列；Y3为胞嘧啶脱氨酶与尿嘧啶糖苷酶抑制剂融合编码序列；Y4为野生型腺苷脱氨酶与突变型腺苷脱氨酶融合编码序列；Y5为Y3与Y4融合编码序列；L3为自剪接多肽；Y6为筛选标记蛋白表达序列；各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列。