[发明专利]利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型

摘要

本申请属于动物肿瘤模型构建技术领域，具体涉及一种利用淋巴瘤细胞株所构建的、可稳定传代的免疫缺陷裸鼠模型及其构建方法的专利申请事宜。该方法利用NK细胞淋巴瘤细胞株、T细胞淋巴瘤细胞株或B细胞淋巴瘤细胞株构建而成，包括：分别对接种对象及淋巴瘤细胞株进行预处理、制备肿瘤混悬液并注射裸鼠、肿瘤细胞传代等过程。本申请所提供的利用NK、T或B淋巴瘤细胞株构建淋巴瘤动物模型的构建方法，其利用基质胶的固定作用，可将淋巴瘤细胞固定在皮下，从而保证裸鼠的成瘤率，表现出成瘤快、成瘤率高的技术优势；另一方面，传代过程中，配合相关肿瘤组织培养液的冷冻操作，可随时复苏和直接构建传代用淋巴瘤动物模型。

主权项

1.一种利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法，其特征在于，该方法利用NK细胞淋巴瘤细胞株、T细胞淋巴瘤细胞株或B细胞淋巴瘤细胞株构建而成，具体构建方法包括如下步骤：（1）分别对接种对象及淋巴瘤细胞株进行预处理，接种对象采用免疫缺陷型裸鼠，对免疫缺陷型裸鼠接种淋巴瘤细胞前，注射抑制免疫药物预处理；对待接种的淋巴瘤细胞株，调整细胞浓度为：（5~20）×106/200μL；（2）制备注射液，并注射裸鼠；将步骤（1）中预处理后淋巴瘤细胞株培养液与基质胶混合均匀，以此作为注射液，制备完成后，皮下注射至裸鼠腋窝；以体积比计，所述淋巴瘤细胞株培养液与基质胶的比例为1:0.8~1.5；注射完成后，正常饲养裸鼠；（3）肿瘤细胞传代，待步骤（2）中裸鼠体内肿瘤成长为成熟瘤后，无菌环境操作剥离瘤块，并剪成小块，在研磨器里研磨分散肿瘤细胞；与步骤（2）相同，调整细胞浓度后与基质胶混合，注射裸鼠；注射完成后，正常培养裸鼠，直至肿瘤长出，表明传代成功，此为第一代裸鼠，重复此传代步骤，在传至不少于5代时，表明可稳定传代的淋巴瘤模型构建成功。