[发明专利]一种用于十字花科作物花粉快速染色的染色液及方法有效
| 申请号： | 201810555491.4 | 申请日： | 2018-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN108680418B | 公开（公告）日： | 2021-03-23 |
| 发明（设计）人： | 李智军;曾晶;谭铭许;谢景 | 申请（专利权）人： | 广东金作农业科技有限公司;广东省农业科学院作物研究所 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 510640 广东省广州市天河区金颖*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种十字花科作物花粉的快速荧光染色方法，包括如下步骤：S1染色液配制：首先将Hoechst33258荧光染料和蔗糖溶于磷酸盐缓冲液PBS，配成Hoechst33258浓度20‑40μg/L、蔗糖浓度8‑10wt％的溶液一，然后配制含乙醇60‑70％(v/v)、乙酯乙酸10％(v/v)、甘油30‑20％(v/v)的溶液二，将溶液一和溶液二按体积比1:1混合摇匀得到染色液，并低温避光保存；S2染色：取步骤S1中制得的染色液于载玻片上，然后从花序上摘取需要染色观察的开放花朵或花蕾，用镊子摘取花药直接放入载玻片上的染色液中，轻轻捏挤花药，散出花粉，取出杂物，涂抹使花粉与染色液混合均匀，然后盖上盖玻片。本发明可以解决目前花粉荧光染色法所存在的繁琐、费时及耗工的问题，同时提高荧光染色法的稳定性和重现性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 十字花科 作物 花粉 快速 染色 方法 | ||
【主权项】：
1.一种十字花科作物花粉的快速荧光染色方法，其特征在于，包括如下步骤：S1染色液配制：首先将Hoechst33258荧光染料和蔗糖溶于磷酸盐缓冲液PBS，配成Hoechst33258浓度20‑40μg/L、蔗糖浓度8‑10wt％的溶液一，然后配制体积百分比含乙醇60‑70％、乙酯乙酸10％、甘油30‑20％的溶液二，将溶液一和溶液二按体积比1:1混合摇匀得到染色液，并低温避光保存；S2染色：取步骤S1中制得的染色液于载玻片上，然后从花序上摘取需要染色观察的开放花朵或花蕾，摘取花药直接放入载玻片上的染色液中，轻轻捏挤花药，散出花粉，取出杂物，涂抹使花粉与染色液混合均匀，然后盖上盖玻片。
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