[发明专利]一种构建甲基化测序文库的方法及相应的接头序列和试剂盒在审
申请号: | 201810563270.1 | 申请日: | 2018-06-04 |
公开(公告)号: | CN108753923A | 公开(公告)日: | 2018-11-06 |
发明(设计)人: | 曹亮;束文圣;吴胜标;王璋;郝祎琪 | 申请(专利权)人: | 广州微芯生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12N15/11;C12N15/10;C40B50/06 |
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地址: | 510300 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种构建甲基化测序文库的方法及相应的接头序列和试剂盒。本发明接头序列中的胞嘧啶碱基经过甲基化修饰。本发明用于构建甲基化测序文库的接头序列,巧妙的应用了C3~C21长碳链的化学修饰,应用于单链形成的茎环结构测序接头,与现有的主流建库接头相比,有不易产生接头二聚、无需额外进行双链退火和无需使用酶打开茎环中环状结构的优势,在重亚硫酸盐转化后,在不影响后期PCR扩增的基础上,大大的节省了反应时间和试剂成本。 | ||
搜索关键词: | 接头序列 测序文库 甲基化 构建 试剂盒 退火 胞嘧啶碱基 甲基化修饰 重亚硫酸盐 化学修饰 环状结构 茎环结构 试剂成本 长碳链 测序 单链 二聚 建库 双链 应用 主流 转化 | ||
【主权项】:
1.一种用于构建甲基化测序文库的接头序列,其特征在于,所述接头序列的5’端用磷酸修饰,且靠近5’端的GATCGGAAGAGC与靠近3’端的GCTCTTCCGATC形成双链茎结构,其余碱基形成环状结构;3’端最后一个碱基为T,并以硫代修饰;同时,所述接头序列中的胞嘧啶碱基经过甲基化修饰。
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