[发明专利]一种利用无底钵伤根接种法进行茄子黄萎病抗性鉴定方法

摘要

本发明公开了一种利用无底钵伤根接种法进行茄子黄萎病苗期抗性鉴定的方法，包括以下步骤：(1)选取饱满的种子，在55℃水温下浸泡15min，边浸泡边搅拌，清水浸泡后，变温催芽，均匀播在下方具有开孔的营养钵内；(2)将茄子黄萎病菌株进行活化，配制孢子悬浮液；(3)待茄苗长至3‑4片真叶，将营养钵下方开孔处长出的茄苗须根剪掉后置于盛放装置内浸泡接种；(4)接种后，待出现症状后进行发病调查，并计算出病情指数。本发明利用无底钵伤根接种法进行抗性鉴定的方法，苗期抗病性鉴定中，无底钵伤根接种法更能体现出茄子抗黄萎病真实抗性，且发病稳定、均匀，发病速度较快，效率高；且病情指数分级标准科学，易掌握。

主权项

1.一种利用无底钵伤根接种法进行茄子黄萎病苗期抗性鉴定的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)茄苗培育：选取饱满的种子，在55℃水温下浸泡15min，边浸泡边搅拌，然后清水浸泡48h后，将种子从清水中捞出，沥干水分，用纱布包好后进行变温处理催芽，待种子露白后，均匀播在下方具有开孔的营养钵内；(2)孢子悬浮液的制备：将茄子黄萎病菌株在PDA培养基平板上进行活化，于26℃培养7d，挑取2‑3mm菌块3块转入150mL PD液体培养基中，于26℃，130rpm/min摇床培养4‑7d后，四层灭菌纱布过滤，通过灭菌水稀释，配制成一定浓度的孢子悬浮液；(3)接种：待茄苗长至3‑4片真叶，用消毒过的剪刀将营养钵下方开孔处长出的茄苗须根剪掉后，将营养钵浸泡在装有孢子悬浮液的盛放装置内浸泡接种，浸泡时间10‑30min；(4)调查评价：接种后，待出现黄萎病典型发病症状后，进行第一次发病调查，以后每10天调查一次，并计算出病情指数；苗期茄子黄萎病分级标准为：0级，植株健康，无病状，生长正常；1级，植株1‑2真叶表现发黄或者叶片脱落；2级，植株3片以上真叶表现病状；3级，大部分叶片出现萎蔫、卷曲或脱落，顶端新叶感病但没有脱落，全株未枯死；4级，植株全株枯死或只剩光杆；病情指数＝∑(相应病级×相应病级病株数)/(总株数×最高级值)×100；茄子黄萎病抗病性分级标准：免疫(I)：DI＝0；抗病(R)：DI≦15；中抗(MR)：15﹤DI≦30，耐病(T)：30﹤DI≦50；中感(MS)：50﹤DI≦70；感病(S)：DI﹥70。