[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒低含量样品的病毒分离方法有效

专利信息
申请号: 201810570334.0 申请日: 2018-06-05
公开(公告)号: CN108486069B 公开(公告)日: 2021-10-26
发明(设计)人: 杨顺利;尹双辉;蔡建平;李丽;尚佑军;刘湘涛 申请(专利权)人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;C12N7/02;C12N15/11;C07K16/10;H01F1/00;H01F41/00
代理公司: 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 代理人: 孙皓晨;马鑫
地址: 730046 甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要: 发明公开了一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)低含量样品的病毒分离方法,还公开了用于猪流行性腹泻病毒富集和分离的免疫纳米磁珠,该免疫纳米磁珠具有磁性的Fe2O3核心和偶联有PEDV膜蛋白特异性单域抗体的表面。传统方法从多重感染和低PEDV含量样品中分离病毒,需要病毒纯化和长时间盲传,分离效率低,限制了PEDV的研究工作。本发明利用纳米磁珠和PEDV特异性单域抗体制备了免疫纳米磁珠,能够有效捕获和富集粪便、组织等多种样品中的PEDV。样品经处理后利用免疫纳米磁珠进行病毒捕获和富集,将结合病毒的免疫纳米磁珠直接接种到Vero细胞,即可实现对病毒分离。本发明制备的免疫纳米磁珠和PEDV分离方法,适用于临床复杂和低病毒含量样品中PEDV的快速、有效分离。
搜索关键词: 种猪 流行性 腹泻 病毒 含量 样品 分离 方法
【主权项】:
1.一种能够捕获并富集猪流行性腹泻病毒(poreine epidemic diarrhea virus,PEDV)的免疫纳米磁珠,其特征在于该免疫纳米磁珠具有磁性的Fe2O3核心和偶联有PEDV膜蛋白特异性单域抗体的表面,该PEDV膜蛋白特异性单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
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