[发明专利]一种获得海藻糖合成酶突变体的方法及其应用在审

专利信息
申请号: 201810599106.6 申请日: 2018-06-12
公开(公告)号: CN108588062A 公开(公告)日: 2018-09-28
发明(设计)人: 李晓明;韦航;李丛;梁树华;谢能中 申请(专利权)人: 南宁中诺生物工程有限责任公司
主分类号: C12N9/90 分类号: C12N9/90;C12P19/24;C12P19/12
代理公司: 广西南宁公平知识产权代理有限公司 45104 代理人: 王素娥
地址: 530003 广西壮族*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明公开了一种获得海藻糖合成酶突变体的方法及其应用。具体是对来源于弯曲高温单孢菌(Thermomonospora curvata)的海藻糖合成酶活性位点附近的氨基酸进行饱和突变,以含有葡萄糖的麦芽糖溶液为底物,快速筛选海藻糖得率高的突变体酶。用此方法获得的突变体酶包括第286位的组氨酸突变为谷氨酰胺H286Q,第286位的组氨酸突变为天冬酰胺H286N和第339位的谷氨酸突变为精氨酸E339R。突变体酶能够利用常规生物工程的方法制备,并用于海藻糖的生产。本发明利用快速检测方法筛选海藻糖合成酶突变体,获得的突变体酶能够大幅降低葡萄糖对海藻糖合成酶活性的抑制作用,提高海藻糖合成酶转化效率,有很高的利用价值。
搜索关键词: 海藻糖合成酶 突变体酶 突变体 葡萄糖 海藻糖 组氨酸 弯曲高温单孢菌 谷氨酸 麦芽糖溶液 谷氨酰胺 活性位点 快速检测 快速筛选 天冬酰胺 转化效率 精氨酸 氨基酸 得率 底物 制备 突变 生物工程 应用 饱和 筛选 生产
【主权项】:
1.一种来源于弯曲高温单孢菌(Thermomonospora curvata)的海藻糖合成酶的突变体,其特征在于,第286位的组氨酸替换为谷氨酰胺,或第286位的组氨酸替换为天冬酰胺,或第339位的谷氨酸替换为精氨酸;来源于弯曲高温单孢菌(Thermomonospora curvata)的海藻糖合成酶的序列如SEQ ID NO.1所示。
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