[发明专利]一种柳杉茎段愈伤组织诱导及植株再生培养方法有效

专利信息
申请号: 201810600276.1 申请日: 2018-06-11
公开(公告)号: CN108812312B 公开(公告)日: 2019-09-27
发明(设计)人: 徐进;董京;陈金慧;施季森 申请(专利权)人: 南京林业大学
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 代理人: 邱兴天
地址: 210037 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种柳杉茎段外植体愈伤组织诱导及植株再生方法,该方法包括以下步骤:选取柳杉组培苗茎段为组织培养材料,将组培苗茎段接入到愈伤组织诱导培养基;待愈伤组织诱导出来以后,将愈伤组织接入到分化培养基上进行不定芽的诱导;不定芽诱导出来以后转入DCR基本培养上进行不定芽和不定根的生长。与现有技术中的柳杉组培方法相比,本发明的柳杉组培苗茎段再生植株培养方法优势在于:有效解决了柳杉外植体在组织培养条件下通过愈伤组织途径植株再生问题,实现了柳杉稳定高效的组培体系,为加快柳杉组培苗植株再生提供技术支撑。
搜索关键词: 植株再生 愈伤组织诱导 组培苗茎段 愈伤组织 不定芽 外植体 茎段 组培 愈伤组织诱导培养基 再生植株培养 组织培养条件 不定芽诱导 分化培养基 技术支撑 有效解决 组织培养 不定根 组培苗 诱导 转入 生长
【主权项】:
1.一种柳杉茎段愈伤组织诱导及植株再生培养方法,其特征在于,包括以下步骤:1)选取柳杉优良无性系组培苗的茎段为组织培养材料,将茎段的针叶剪除,取3~4cm长的茎段接入愈伤组织诱导培养基培养,使高度分化的茎段脱分化为愈伤组织,其中,愈伤组织诱导培养基配方为:改良DCR+2,4‑D 0.5‑2.0mg/L+6‑BA 0.1‑1.5mg/L+水解酪蛋白400‑600mg/L+L‑谷氨酰胺400‑600mg/L+30‑40g/L蔗糖;2)将愈伤组织接入继代培养基进行继代增殖培养;柳杉茎段诱导愈伤组织的继代增殖培养基配方为改良DCR+2,4‑D 0.5‑2.0mg/L+6‑BA 0.1‑1.5mg/L+25‑35g/L蔗糖;3)将柳杉茎段诱导的愈伤组织转入不定芽诱导培养基,诱导培养产生不定芽;不定芽诱导培养基为:改良DCR+2,4‑D 1.0mg/L+6‑BA 1.2mg/L;4)待不定芽长到2‑3cm时,从愈伤组织上切下,将不定芽转入生长培养基进行不定芽与不定根的生长培养,生长培养基为DCR基本培养基。
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