[发明专利]一种可视化检测邻苯二甲酸二丁酯含量的方法

摘要

本发明公开了一种可视化检测邻苯二甲酸二丁酯含量的方法，通过先在板上固定一层纤维素用于抗原的吸附，然后加入邻苯二甲酸二丁酯标准液与固定在酶标板上的邻苯二甲酸二丁酯竞争一抗，使固定在板上的一抗进一步与辣根过氧化酶（HRP）修饰的二抗复合物结合，形成竞争型的免疫传感器；在HRP催化下，TMB被H₂O₂氧化成TMB²⁺（酸性条件）；加入TMB²⁺将金纳米棒刻蚀成不同的长径比,从而呈现出丰富多彩的颜色。随着目标物邻苯二甲酸二丁酯的增加，固定在板上的HRP量反而减少,使得金纳米棒被刻蚀的程度减小，从而呈现不同的颜色；该方法可以通过裸眼判断酶标板的颜色，进行邻苯二甲酸二丁酯的半定量分析，具有操作简单，灵敏度高，特异性好等特点。

主权项

1.一种可视化检测邻苯二甲酸二丁酯含量的方法，其特征在于：其包括如下具体步骤：（1）金纳米棒的制备：在双表面活性剂系统中合成金纳米棒溶液；（2）将步骤（1）合成的金纳米棒溶液进行离心处理，然后将分离出的沉淀物分散在终浓度为0.1 M的CTAB溶液；（3）酶联免疫吸附试验：在酶标板底层固定一层纤维素，然后将不同浓度的邻苯二甲酸二丁酯吸附在酶标板的孔板上，再依序加入一抗和修饰辣根过氧化酶的二抗，以使其形成竞争型的免疫传感器；（4）用洗涤液洗去步骤（3）未被固定到酶标板上的一抗和过氧化氢酶修饰的二抗；（5）往经步骤（4）处理的酶标板的各孔板中加入过氧化氢和TMB的混合溶液，使其产生TMB+；（6）往经步骤（5）处理过的酶标板的各孔板中加入盐酸，在酸性条件下，将TMB+质子化产生TMB2+；（7）将步骤（2）制得的金棒溶液加入到经步骤（6）处理后的酶标板上，使酶标板中的TMB2+对金纳米棒溶液进行刻蚀并呈现出若干种颜色；（8）通过酶标仪对经步骤（7）处理所得酶标板的各孔板进行测量其光谱且采用图像摄取装置对其酶标板的孔板进行图像摄取，并记录数据。