[发明专利]基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)

摘要

本发明公开了一种基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，属于环境分析技术领域。先制备量子点@铽离子‑单磷酸鸟嘌呤核苷酸(QDs@Tb‑GMP)复合物，酸性磷酸酶(ACP)催化GMP水解从而破坏QDs@Tb‑GMP的结构，导致Tb的绿色荧光淬灭，而QDs的红色荧光不变。As(V)可抑制ACP的活性，使得Tb的荧光不淬灭，随着As(V)浓度的增大，Tb与QDs的荧光比值(I547/I652)逐渐增加，构建了比率荧光法检测As(V)。此外，在紫外灯下，随着As(V)浓度的增加，QDs@Tb‑GMP溶液从红紫色变为橙色，可实现As(V)的可视化分析。QDs@Tb‑GMP的制备方法简便、水溶性好、环境友好，该比率荧光法不仅改善了测定As(V)的灵敏度，结合氧化处理还可用于检测实际样品中无机砷总量。

主权项

1.基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，其特征在于，包括以下步骤：将20μL 800U/L的酸性磷酸酶溶液、不同浓度的As(V)溶液和50μL HEPES缓冲溶液混合，用超纯水稀释到总体积为100μL，在37℃水浴中反应90min，再加入150μL的QDs@Tb‑GMP溶液，漩涡混匀后，在37℃水浴中反应40min，采用荧光分光光度计测量溶液在激发波长为280nm时的荧光光谱，根据不同浓度的As(V)与对应的Tb与QDs的荧光信号强度之间的比值的线性关系来实现对As(V)的高灵敏和选择性检测，或还可结合氧化处理检测实际样品中无机砷总量，或在紫外灯照射下，观察溶液颜色的变化来实现对As(V)的快速可视化分析。