[发明专利]一种采用植物微组织直接RT-PCR检测多种植物病毒的方法有效
申请号: | 201810608925.2 | 申请日: | 2018-06-13 |
公开(公告)号: | CN108728579B | 公开(公告)日: | 2022-09-13 |
发明(设计)人: | 李姣 | 申请(专利权)人: | 四川师范大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/94 |
代理公司: | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人: | 胡琳梅 |
地址: | 610011 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种采用植物微组织直接RT‑PCR检测多种植物病毒的方法,依次包括以下步骤:(1)模板RNA提取和逆转录:在实体显微镜下,用无菌注射器针刺入待检植物组织样品的某一部位(茎、叶柄或根),并停留2‑3秒,然后将带有植物微组织的无菌注射器针尖直接浸入逆转录混合物中进行反应,以便进行逆转录,得到cDNA;(2)PCR反应:将步骤(1)得到的cDNA进行PCR反应,得到反应产物;(3)结果判断:将步骤(2)所得的反应产物进行电泳分析,得到检测结果;本发明方法不需要单独步骤来分离提取待检测样品的RNA,能在较短的时间内制备用于PCR反应的RNA模板,方便快捷,且不需要仪器设备;广谱性高,可检测多种植物病毒,大大提高植物病毒检测的效率和准确性。 | ||
搜索关键词: | 一种 采用 植物 组织 直接 rt pcr 检测 多种 病毒 方法 | ||
【主权项】:
1.一种采用植物微组织直接RT‑PCR检测多种植物病毒的方法,其特征在于,依次包括以下步骤:(1)模板RNA的提取和逆转录:在实体显微镜下,用无菌注射器针刺入待检植物组织样品的某一部位,并停留2‑3秒,然后将带有植物微组织的无菌注射器针尖直接浸入逆转录混合物中进行反应,以便进行逆转录,得到cDNA;(2)PCR反应:将步骤(1)得到的cDNA进行PCR反应,得到反应产物;(3)结果判断:将步骤(2)所得的反应产物进行电泳分析,得到检测结果。
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