[发明专利]一种检测痕量单链DNA片段的方法在审
申请号: | 201810613310.9 | 申请日: | 2018-06-14 |
公开(公告)号: | CN108588197A | 公开(公告)日: | 2018-09-28 |
发明(设计)人: | 陆骊工;刘少卿;占美晓;李勇;何旭;忻勇杰;肖静 | 申请(专利权)人: | 珠海市人民医院 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686 |
代理公司: | 南京中律知识产权代理事务所(普通合伙) 32341 | 代理人: | 沈振涛 |
地址: | 519000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供的一种检测痕量单链DNA片段的方法,包括以下步骤:设计粘性末端Adapter对,包括Adapter L和Adapter R;其中,Adapter L用于捕获目标DNA片段的5`端,Adapter R用于捕获目标DNA片段的3`端;向含目标DNA片段的样品中加入粘性末端Adapter对反应,在DNA Ligase的作用下,使Adapter对与目标DNA片段的粘性末端连接;产物纯化后,通过PCR扩增即得富集后的目标DNA。本发明粘性末端Adapter对用于捕获低起始量的目标DNA,使其获得大量富集;该Adapter对用于DNA片段富集,操作流程简单,能够快速获得大量的DNA片段,从而解决最为前沿的NGS文库构建、芯片杂交、荧光免疫等具体分子生物学检测领域的样品制备困难的问题。 | ||
搜索关键词: | 粘性末端 富集 单链DNA片段 目标DNA片段 捕获目标 目标DNA 种检测 痕量 分子生物学检测 操作流程 产物纯化 文库构建 芯片杂交 样品制备 荧光免疫 起始量 捕获 | ||
【主权项】:
1.一种检测痕量单链DNA片段的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)设计粘性末端Adapter对,包括Adapter L和Adapter R;其中,Adapter L用于捕获目标单链DNA片段的5`端,Adapter R用于捕获目标单链DNA片段的3`端;(2)向含目标单链DNA片段的样品中加入粘性末端Adapter对反应,在DNA Ligase的作用下,Adapter对与目标单链DNA片段的粘性末端连接;(3)步骤(2)产物纯化后,通过PCR扩增即得富集后的目标单链DNA片段。
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