[发明专利]一种白介素-6的定量检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种白介素‑6的定量检测方法以及制备的专用检测试剂盒，由顺磁微粒偶联抗体、生物素化抗体与抗原反应，形成超顺磁微粒偶联抗体—抗原—生物素化抗体免疫复合物；经过洗涤然后再加入亲和素反应，形成超顺磁微粒偶联抗体—抗原—生物素化抗体—亲和素免疫复合物；经过洗涤再加入生物素化酶反应，并加入与酶对应的化学发光底物，免疫复合物上的酶作用于发光底物，在酶促作用下发光，由测定仪检测发光信号。本发明提供的试剂盒与现有试剂盒相比，可以大大提高化学发光试剂产品的灵敏度。通过对本发明制备的试剂盒进行方法学评价，其分析灵敏度为1.0pg/ml，检测范围1.5‑5000pg/ml，本发明试剂盒与市售的罗氏IL‑6电化学发光法试剂具体较高的相关性和符合率，性能相当。

主权项

1.一种白介素‑6的定量检测方法，其特征在于：包括下述步骤：第一步，取抗体偶联超顺磁微粒、生物素化抗体与待测样本发生特异性结合反应，得到第一反应物；其中所述抗体偶联超顺磁微粒为超顺磁微粒与抗IL‑6单克隆抗体B偶联得到的产物，生物素化抗体为生物素N羟基丁二酰亚胺酯与抗IL‑6单克隆抗体A偶联得到的产物；第二步，取亲和素与第一反应物发生特异性结合反应，得到第二反应物；其中所述的亲和素为链霉亲和素蛋白；第三步，取生物素化酶与第二反应物发生特异性结合反应，得到第三反应物；其中生物素化酶为生物素N羟基丁二酰亚胺酯与酶偶联得到的产物；第四步，取化学发光底物与第三反应物发生酶促反应，测定发光信号，获得白介素‑6的浓度值。