[发明专利]注射接种获得感染云南烟草丛顶病4种病原物病株的方法在审
| 申请号： | 201810620243.3 | 申请日： | 2018-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN108990586A | 公开（公告）日： | 2018-12-14 |
| 发明（设计）人： | 李凡;马龑;刘芳;李涛;吕婧;谭松涛;刘琴利;李月月;肖啟海;陈海如 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | A01G7/06 | 分类号： | A01G7/06 |
| 代理公司： | 北京名华博信知识产权代理有限公司 11453 | 代理人： | 李中强 |
| 地址： | 650201 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种注射接种获得感染云南烟草丛顶病4种病原物病株的方法，属于植物病害技术领域，具体步骤为：取0.5 g携带云南烟草丛顶病4种病原物的植物组织用液氮研磨成粉末，再加入PBS缓冲液研磨，所得匀浆离心待注射；在植株叶片上扎孔注射；注射接种半个月后，进行症状观察以及RT‑PCR检测，即可获得感染4种云南烟草丛顶病病原物的活体样本。本发明能高效的将云南烟草丛顶病4种病原物同时接种在健康植株上，突破通过摩擦接种不能把云南烟草丛顶病4种病原物均接种在健康植株上的技术屏障，避免了利用蚜虫传毒必须从活体植株获毒的限制以及因蚜虫传毒效率差异而引起试验误差的缺陷，丰富了接种所需带毒植物组织的保存方式。 | ||
| 搜索关键词： | 烟草丛顶病 病原物 注射接种 接种 健康植株 蚜虫传毒 感染 注射 保存方式 活体样本 活体植株 摩擦接种 试验误差 效率差异 液氮研磨 症状观察 植物病害 植物组织 植株叶片 研磨 毒植物 匀浆 扎孔 屏障 携带 | ||
【主权项】：
1.一种注射接种获得感染云南烟草丛顶病4种病原物病株的方法，其特征在于：具体步骤为：1）传毒材料的准备：携带云南烟草丛顶病4种病原物的植物组织作为传毒材料；2）传毒材料的处理：取0.5 g植物组织于灭过菌的研钵内，通过液氮冷冻研磨成粉末，加入PBS缓冲液2 mL以完全浸润粉末，然后进行研磨溶解，溶解后的匀浆以中速离心获得上清接种液；3）注射接种：将步骤2）所得到的上清接种液，用注射器吸取后在植株叶片上扎孔注射；4）注射接种半个月后，对接种植株进行症状观察，并通过RT‑PCR技术检测云南烟草丛顶病病原物，即可获得感染4种云南烟草丛顶病病原物的活体样本。
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