[发明专利]一种干细胞活性因子冻干粉的制备方法有效
申请号: | 201810633551.X | 申请日: | 2018-06-20 |
公开(公告)号: | CN108753708B | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 李玉才;吴炳元;成芳;苏晓华 | 申请(专利权)人: | 廊坊康宝汇泰生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C07K14/52;G01N33/68;A61K35/28;A61P17/02 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 张黎 |
地址: | 065001 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 本发明涉及干细胞技术研究领域,提供了一种人间充质干细胞分泌的干细胞活性因子冻干粉的制备方法。所提供的人脂肪干细胞原料来源充足,提取安全方便,无任何不良反应,使用安全可靠。其制备过程具体包括以下步骤:(1)外源因子检测;(2)脂肪干细胞的原代分离、培养和传代;(3)间充质干细胞的鉴定;(4)上清液的收集;(5)冻干粉的制备;(6)对上述上清液和冻干粉的干细胞活性因子进行检测;(7)溶媒的配制和灌装。本发明制备的冻干粉相较于上清液易于保存,运输,且有效的保存了因子的活性,能够应用于美容行业,细胞因子含量高,冻干粉中水分含量低从而易于保存,烫伤后采用本发明中制得的冻干粉,加入生物多糖焦胶、胶原蛋白、叶酸、无菌超纯水制成的组合物去涂抹伤口时伤口的愈合率高。 | ||
搜索关键词: | 冻干粉 制备 干细胞活性 上清液 脂肪干细胞 保存 伤口 人间充质干细胞 间充质干细胞 传代 干细胞技术 安全方便 胶原蛋白 美容行业 生物多糖 外源因子 细胞因子 原代分离 制备过程 超纯水 检测 烫伤 分泌 灌装 溶媒 涂抹 无菌 叶酸 愈合 配制 运输 应用 研究 | ||
【主权项】:
1.一种干细胞活性因子冻干粉的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)外源因子检测;(2)脂肪干细胞的原代分离、培养和传代;(3)间充质干细胞的鉴定;(4)上清液的收集;(5)冻干粉的制备;(6)对上述上清液和冻干粉的干细胞活性因子进行检测;(7)溶媒的配制和灌装;步骤(2)中所述的脂肪干细胞的原代分离、培养和传代具体过程如下:首先将脂肪稀释,吹散后进行离心,小心抽取底部沉淀物,然后用消化液对抽取得到的底部沉淀物进行消化,接着再次离心,吸取细胞放入一次性培养皿中,并加入适量间充质干细胞无血清培养基,置于37℃,5%的CO2培养箱内进行培养,培养5天以后出现细胞集落,培养10‑15天细胞密度达到80%左右时,进行传代;所述的消化液为浓度为0.1%‑0.3%的胰蛋白酶或浓度为0.5%‑2%的胶原酶。
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