[发明专利]一种热启动Taq DNA聚合酶的制备方法在审
| 申请号： | 201810651498.6 | 申请日： | 2018-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN108949716A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 郑春杨;刘金朝;申奥;张国林 | 申请（专利权）人： | 青岛中科爱博生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12 |
| 代理公司： | 青岛华慧泽专利代理事务所(普通合伙) 37247 | 代理人： | 马千会 |
| 地址： | 266000 山东省青*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开一种热启动TaqDNA聚合酶的制备方法，包括以下步骤：(1)将纯化的TaqDNA聚合酶作为底物包被，利用噬菌体展示技术进行三轮的淘选流程，得到富集的同底物具有高亲和力的阳性备选配体；(2)分析富集的阳性备选配体序列组成，同底物结构比对后，选择若干可以与之结合的阳性克隆，利用大肠杆菌体外表达系统表达得到系列阳性配体；(3)将体外表达得到的配体、TaqDNA和多克隆抗体按照3：3：1的比例混合后得到热启动TaqDNA聚合酶。本发明制备的热启动TaqDNA聚合酶，能够在最大限度保持酶活性的基础上常温更好的封闭酶的活性，在分子诊断多个平台上验证其使用效果优于传统的热启动TaqDNA聚合酶。 | ||
| 搜索关键词： | 热启动TaqDNA聚合酶 配体 制备 备选 底物 富集 噬菌体展示技术 体外表达系统 大肠杆菌 多克隆抗体 底物结构 分子诊断 高亲和力 体外表达 阳性克隆 传统的 酶活性 热启动 包被 比对 验证 封闭 分析 | ||
【主权项】：
1.一种热启动TaqDNA聚合酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将纯化的TaqDNA聚合酶作为底物包被，利用噬菌体展示技术进行三轮的淘选流程，得到富集的同底物具有高亲和力的阳性备选配体；(2)分析富集的阳性备选配体序列组成，同底物结构比对后，选择若干可以与之结合的阳性克隆，利用大肠杆菌体外表达系统表达得到系列阳性配体；(3)将体外表达得到的配体、TaqDNA和多克隆抗体按照3：3：1的比例混合后得到热启动TaqDNA聚合酶。
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