[发明专利]重组鱼类白细胞介素-2的工程菌及其产物的制备方法在审
申请号: | 201810658538.X | 申请日: | 2018-09-13 |
公开(公告)号: | CN108949598A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 胡向东;项黎新;叶茂 | 申请(专利权)人: | 浙江皇冠科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C07K14/55;C12R1/645 |
代理公司: | 北京国翰知识产权代理事务所(普通合伙) 11696 | 代理人: | 卫翠婷 |
地址: | 310012 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了重组鱼类白细胞介素‑2的工程菌及其产物的制备方法,该工程菌的制备方法为:将鱼淋巴细胞的分离,丝裂原诱导,提取总mRNAs,再将总mRNAs逆转录成cDNA模版,PCR扩增得白细胞介素‑2基因片段;将IL2序列和pYES2质粒双酶切,回收相应的酶切片段后连接IL2基因和载体,连接液转化宿主菌,筛选,获得重组的IL2‑pYES2质粒;将质粒电转化导入酵母菌株中,获得酵母工程菌。有益效果为:本发明工程菌能成功、高效表达出鱼干扰素重组蛋白,工程菌产物‑重组鱼类白细胞介素‑2的产量高,重组白细胞介素‑2基因易于诱导表达且表达稳定性,不需要进行纯化即可应用。 | ||
搜索关键词: | 白细胞介素 工程菌 质粒 制备 鱼类 总mRNAs 淋巴细胞 干扰素 酵母工程菌 高效表达 基因片段 酵母菌株 酶切片段 诱导表达 重组蛋白 转化宿主 电转化 连接液 逆转录 双酶切 丝裂原 基因 模版 诱导 筛选 回收 应用 成功 | ||
【主权项】:
1.重组鱼类白细胞介素‑2的工程菌,其特征在于:所述工程菌是具有重组鱼类白细胞介素‑2基因的酵母菌。
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