[发明专利]一种鸡安卡拉病LAMP引物组、试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201810665619.2 | 申请日: | 2018-06-26 |
公开(公告)号: | CN108642211A | 公开(公告)日: | 2018-10-12 |
发明(设计)人: | 赵福振;邵建宏;罗宝正;廖秀云;沙才华;陈轩;薄清如 | 申请(专利权)人: | 珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 王国标 |
地址: | 519000 广东省珠*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种鸡安卡拉病LAMP引物组、试剂盒及其检测方法。所述鸡安卡拉病LAMP试剂盒包括2×反应液RM 12.5μL,内引物FIP、BIP 40μmol/L各1.0μL,外引物F3、B3 5μmol/L各1.0μL,Bst DNA聚合酶1.0μL,荧光染料Ⅰ0.5μL,以及环引物LF、LB 20μmol/L各1.0μL。所述试剂盒的检测方法,包括步骤:1)提取DNA模板;2)将LAMP反应体系与2.0μL的DNA模板混合,补水至25μL,然后加入20.0μL的石蜡油;3)通过Real‑Time PCR System设定反应条件63℃,30s,1个循环;60s,40个循环;每次循环结束时收集荧光信号。其引物组根据GenBank中公布的FADV‑4的核苷酸序列而设计,反应时间比Taqman法可缩短20min以上,而且无需额外购置专用实验仪器或耗材,适配度高。 | ||
搜索关键词: | 试剂盒 种鸡 检测 核苷酸序列 内引物FIP 反应条件 环引物LF 实验仪器 荧光染料 荧光信号 提取DNA 石蜡油 时间比 适配度 外引物 引物组 补水 耗材 | ||
【主权项】:
1.一种鸡安卡拉病LAMP引物组,包括引物FIP、BIP、F3、B3、LF和LB,各引物的序列如SEQ ID №1~6所示。
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