[发明专利]一种定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法

摘要

本发明涉及一种定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，选取健壮养心菜成年植株，将中间部位冲洗干净后，茎、叶分离，茎切5‑8cm段，对茎段进行预消毒后，用蒸馏水冲洗干净，再用0.1％的升汞溶液灭菌，最后用蒸馏水冲洗干净，得到无菌的茎段，将无菌的茎段先切成1cm的茎段，再纵切，得到半圆柱形茎段，将半圆柱形茎段接种于诱导培养基中，12‑15d后获得茎段愈伤组织，然后通过盐分递增的盐基多代培养，不断诱导提高养心菜植株的耐盐性。该方法操作简单，效率高，能显著提高养心菜植株的耐盐性，获得的耐盐植株，耐盐性可提高30％，生根苗在含盐量7g/kg土壤正常生长，成苗在含盐量10g/kg土壤能正常生长。

主权项

1.一种定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)选取健壮养心菜成年植株，将中间部位冲洗干净后，茎、叶分离，茎切5‑8cm段备用，对茎段进行预消毒后，用灭菌后的蒸馏水冲洗干净，再用0.1％的升汞溶液灭菌10‑15min，最后用灭菌后的蒸馏水冲洗干净，得到无菌的茎段；(2)将步骤(1)中得到的无菌的茎段先切成1cm的茎段，再纵切，得到半圆柱形茎段，将半圆柱形茎段接种于诱导培养基中，12‑15d后获得茎段愈伤组织；(3)将步骤(2)的茎段愈伤组织接种到含有110mmol/L NaCl的继代培养基中，培养15‑20d，然后选取淡黄色的愈伤组织移入含有130mmol/L的NaCl的MS培养基中，进行第二代盐基培养；15‑20d后，选取淡黄色的愈伤组织移入170mmol/L NaCl的MS培养基中，进行第三代盐基培养；15‑20d后，选淡黄色的愈伤组织移入190mmol/L的NaCl的MS培养基中，进行第四代盐基培养，培养15‑20d，然后选择长势良好的组织移入210mmol/L的NaCl的MS培养基中，进行第五代盐基培养，培养15‑20d后，获得耐盐愈伤组织；(4)将步骤(3)的耐盐愈伤组织移入分化培养基中，继续培养15‑20d后，选取生长健壮的小苗移入生根培养基中，10‑15d完成生根，获得耐盐试管苗，继续培养28‑32h，闭瓶炼苗10‑15d，然后移植至体积比为2:1的草炭和蛭石形成的基质中，30d后移栽至大棚土壤中。