[发明专利]一种纽莫康定B0丝氨酸类似物的分离纯化方法在审
| 申请号： | 201810689082.3 | 申请日： | 2018-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN110655557A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 张磊 | 申请（专利权）人： | 浙江医药股份有限公司新昌制药厂 |
| 主分类号： | C07K7/56 | 分类号： | C07K7/56;C07K1/20;C07K1/16 |
| 代理公司： | 11042 北京乾诚五洲知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 付晓青;李广文 |
| 地址： | 312500 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种纽莫康定B0丝氨酸类似物的分离纯化方法，所述分离纯化方法包括以下步骤：a)用聚合物基质色谱填料进行第一次层析富集，等度洗脱，收集纯度＞30％部分；b)用亲水作用色谱填料进行第二次层析纯化，等度洗脱，收集纯度＞60％部分；c)用反相硅胶基质色谱填料进行第三次层析纯化，等度洗脱，收集纯度＞80％部分；d)第三次纯化后，纽莫康定B0丝氨酸类似物纯度＞80％的层析液，减压浓缩除去溶剂后冻干，得到纽莫康定B0丝氨酸类似物。通过本发明的制备方法得到的纯度＞80％的纽莫康定B0丝氨酸类似物进行了结构鉴定，为进一步进行生物活性的筛选或对其进行结构修饰后再进行生物活性筛选，奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 丝氨酸类似物 等度洗脱 次层 分离纯化 色谱填料 亲水作用色谱 生物活性筛选 聚合物基质 反相硅胶 结构鉴定 结构修饰 生物活性 层析液 溶剂 冻干 富集 基质 制备 筛选 | ||
【主权项】：
1.一种纽莫康定B0丝氨酸类似物的分离纯化方法，所述分离纯化方法包括以下步骤：/na)将含有丝氨酸类似物的纽莫康定B0粗品采用色谱填料进行第一次层析富集，其中，所述色谱填料为聚苯乙烯/二乙烯基苯UniPS、聚苯乙烯/二乙烯基苯UniPSA或聚丙烯酸UniPSN，流动相为甲醇水溶液、乙醇水溶液、乙腈水溶液或丙酮水溶液；层析后进行等度洗脱或梯度洗脱、分段收集，以得到含有纯度＞30％的纽莫康定B0丝氨酸类似物的第一次层析富集液；/nb)将所述第一次层析富集液进行减压浓缩以除去溶剂，再用亲水作用色谱填料进行第二次层析纯化，所述亲水作用色谱填料为Xamide、X3或HILIC，流动相为甲醇水溶液、乙醇水溶液、乙腈水溶液或丙酮水溶液；层析后进行等度洗脱或梯度洗脱、分段收集，以得到含有纯度＞60％的纽莫康定B0丝氨酸类似物的第二次层析富集液；/nc)将所述第二次层析富集液进行减压浓缩以除去溶剂，再用反相硅胶基质色谱填料第三次层析纯化，所述反相硅胶基质色谱填料为C8或C18，流动相为甲醇水溶液、乙醇水溶液、乙腈水溶液或丙酮水溶液；层析后进行等度洗脱或梯度洗脱、分段收集，以得到含有纯度＞80％的纽莫康定B0丝氨酸类似物的第三次层析富集液；/nd)将所述第三次层析富集液进行减压浓缩以除去溶剂，再冻干，以得到纯度＞80％的纽莫康定B0丝氨酸类似物干粉。/n
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