[发明专利]一种茶叶中游离氨基酸对映异构体的检测方法

摘要

本发明属于茶叶分析检测技术领域，具体涉及一种茶叶中游离氨基酸对映异构体的检测方法。其包括以下步骤：a)氨基酸混合消旋体标准品溶液的配制；b)氨基酸混合消旋体标准品的衍生化反应；c)氨基酸对映异构体定性参数的确定及定量标准工作曲线的绘制；d)茶叶中游离氨基酸对映异构体的定性定量分析。本发明方法在极广的浓度范围内（12.5‑2500 nmol）呈现较好的线性关系，相关系数高达0.9987，检测限低至2.5 nmol，相对标准偏差值介于3.26‑11.48%，可实现对茶叶中15对常见游离氨基酸对映异构体的同时精确定性定量检测。

主权项

1.一种茶叶中游离氨基酸对映异构体的检测方法，其特征包括以下步骤：1）氨基酸混合消旋体标准品溶液的配制将消旋化氨基酸标准品配制成2.5 μmol/mL的盐酸溶液，‑20 ºC低温保存待用；2）氨基酸混合消旋体标准品的衍生化反应精确吸取5 μL‑1000 μL不同梯度体积的步骤1）所述氨基酸混合消旋体标准品溶液，采用酯化‑五氟丙酸酐酰化衍生法将各氨基酸标准品衍生化为易汽化的氨基酸PFP异丙酯衍生物，除去多余反应试剂后用四氢呋喃溶解，静置待用；3）氨基酸对映异构体定性参数的确定及定量标准工作曲线的绘制将步骤2）所述氨基酸对映异构体混合衍生物进行手性气相色谱‑质谱联用分析，以各氨基酸对映异构体衍生物的保留时间、质谱特征峰离子作为定性参数，并以氨基酸对映异构体标准品浓度为横坐标、氨基酸对映异构体衍生物定量离子峰为纵坐标，绘制氨基酸对映异构体的标准工作曲线；4）茶叶中游离氨基酸对映异构体的定性定量分析称取茶粉样1.0 g，加入50 mL沸纯净水，充分浸提并高速离心后，取1 mL上层清液进行酯化‑五氟丙酸酐酰化衍生化，除去多余反应试剂后用四氢呋喃溶解；采用与步骤3）相同的手性气相色谱‑质谱联用分析方法对获得的氨基酸衍生物进行分析，根据步骤3）中标准品的保留时间及定性离子对茶汤中的游离氨基酸对映异构体进行定性，根据步骤3）中获得的氨基酸对映异构体标准工作曲线，计算出茶叶中各游离氨基酸对映异构体的含量。