[发明专利]大肠杆菌基因工程菌的构建及其生产L-色氨酸的用途有效
| 申请号： | 201810697679.2 | 申请日： | 2018-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN108753860B | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 谢希贤;鄢芳清;徐庆阳;陈宁;韩亚昆;门佳轩;李燕军;马倩;张成林;范晓光 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P13/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭晓迪 |
| 地址： | 300222 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一株大肠杆菌基因工程菌及利用其快速高效生产L‑色氨酸的方法。所述基因工程菌是通过代谢工程的方法(包括基因整合和点突变与启动子替换)对大肠杆菌中L‑色氨酸合成相关基因进行对应改造组合，又在其基因组上引入来自嗜酸乳杆菌的谷氨酰胺合成酶编码基因glnA后得到的。利用该菌株进行摇瓶发酵可在24h内积累L‑色氨酸达10‑12g/L，为目前国内报导的最高值；该菌株在5L发酵罐发酵35‑40h可积累L‑色氨酸达40‑45g/L，相比现有携带质粒的L‑色氨酸工业化菌株提高了15.1％，说明该菌株具有良好的工业化生产L‑色氨酸的潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 色氨酸 菌株 大肠杆菌基因工程菌 谷氨酰胺合成酶 合成相关基因 大肠杆菌 发酵罐发酵 基因工程菌 嗜酸乳杆菌 编码基因 代谢工程 高效生产 基因整合 摇瓶发酵 点突变 基因组 启动子 构建 质粒 积累 替换 携带 引入 改造 生产 | ||
【主权项】：
1.一种高产L‑色氨酸的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是在大肠杆菌W3110的基因组上，将色氨酸操纵子的启动子替换为Ptrc启动子的同时引入trpE(S40F)突变；将由Ptrc启动子控制的aroG(S180F)基因整合在tyrR位点；将Plac启动子控制的serA(H344A,N364A)基因整合在yjiV假基因位点；进一步地将Plac启动子控制的核苷酸序列如SEQ ID No：9所示的谷氨酰胺合成酶编码基因glnA整合至ycjV假基因位点；所述trpE(S40F)基因的核苷酸序列如SEQ ID No：2所示；所述aroG(S180F)基因的核苷酸序列如SEQ ID No：3所示；所述serA(H344A,N364A)基因的核苷酸序列如SEQ ID No：5所示。
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