[发明专利]一种基于金属离子标记的电化学检测方法

摘要

本发明公开了一种基于金属离子标记的电化学检测方法，采用的技术方案包括三种同类方法，以方法一为基础方法，该方法包括以下过程：(1)金属离子材料标记待测物的一株抗体；(2)具有特异亲和性一对物质中的一个标记待测物的另一株抗体；(3)具有特异亲和性一对物质中的另一个标记纳米微球；(4)电化学检测过程。本发明利用金属离子的电化学特性以及电化学法对金属离子检测的高度灵敏性，采用金属离子标记免疫复合物并通过纳米微球收集免疫复合物，然后通过分离将带有免疫复合物的纳米微球富集于电极表面，大大提高了检测灵敏度，该方法稳定性高、重复性好、结果准确可靠，实现了快速、灵敏检测的目的，拓展了基于金属离子标记的电化学检测方法在体外诊断领域中的应用。

主权项

1.一种基于金属离子标记的电化学检测方法，其特征在于：包括以下过程：(1)金属离子材料标记待测物的一株抗体；(2)具有特异亲和性一对物质中的一个标记待测物的另一株抗体；(3)具有特异亲和性一对物质中的另一个标记纳米微球；(4)检测过程①将含有待测物的样本、金属离子材料标记的待测物的一株抗体和具有特异亲和性的一对物质中的一个标记待测物的另一株抗体加入到反应池中，经过3～90min的温育反应，形成一端标记有金属离子材料另一端标记有具有特异性亲和性的一对物质中的一个的免疫复合物；②然后向步骤①反应后的混合物中加入表面标记有具有特异亲和性的一对物质中的另一个的纳米微球，步骤①中免疫复合物一端的具有特异亲和性的一对物质中的一个与标记在纳米微球表面的具有特异性亲和性一对物质中的另一个进行特异性结合，形成表面结合了步骤①中的免疫复合物的纳米微球；③采用分离的方式将步骤②中表面结合了步骤①中的免疫复合物的纳米微球固定到工作电极表面，然后移除反应池中的剩余液体，加注电解液；④采用三电极体系或二电极体系进行测定，将电极连接在电化学工作站上，利用电化学检测方法测定纳米微球表面的免疫复合物上金属离子的伏安曲线图，然后在测得的伏安曲线图中金属离子理论特征峰的±100mV范围内寻找实际特征峰，计算半峰面积，用半峰面积与待测物浓度之间用Log‑Log回归方程进行拟合制备标准曲线，通过标准曲线计算待测物的含量。