[发明专利]一种全基因组杂交克隆方法在审
申请号: | 201810703354.0 | 申请日: | 2018-06-15 |
公开(公告)号: | CN108949743A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 翁炳焕 | 申请(专利权)人: | 翁炳焕 |
主分类号: | C12N15/06 | 分类号: | C12N15/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 317300 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 一种用于生物领域的全基因组杂交克隆方法,其特征在于,以鼠sp2/0细胞替换传统基因克隆中所用的基因载体及感受态细胞,将欲作全基因组克隆的细胞与能无限繁殖的sp2/0细胞混合,以0.25%胰蛋白酶和II型胶原酶混合液消化,然后经PEG作用,两亲代细胞依次发生胞膜、胞浆、胞核、染色体及基因组的融合杂交,经HAT筛选而获得既具有待克隆基因组又能无限繁殖的继承了两亲代细胞遗传物质的杂交细胞,即传统基因克隆中的感受态细胞,使杂交细胞中的全基因组随着杂交细胞的无限繁殖而克隆,解决了只能克隆短片段DNA而不能同步克隆细胞内全基因组的传统基因克隆技术所不能解决的问题。 | ||
搜索关键词: | 克隆 全基因组 传统基因 杂交细胞 细胞 感受态细胞 亲代细胞 杂交克隆 繁殖 基因组 胰蛋白酶 短片段DNA 基因载体 生物领域 遗传物质 混合液 染色体 胞核 胞浆 胞膜 替换 杂交 筛选 消化 融合 继承 | ||
【主权项】:
1.一种全基因组杂交克隆方法,其特征在于,以能在体外无限繁殖的鼠sp2/0细胞替换传统基因克隆的基因载体和感受态细胞,通过细胞融合将待克隆基因导入sp2/0细胞,使之与sp2/0细胞的DNA和/或RNA杂交并随sp2/0细胞的无限繁殖而克隆,解决了只能克隆短片段DNA而不能同步克隆细胞内全基因组的传统基因克隆技术所不能解决的问题。
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