[发明专利]一种β-甘露聚糖酶密码子优化序列及提高毕赤酵母工程菌表达水平的方法在审
| 申请号： | 201810708501.3 | 申请日： | 2018-07-02 |
| 公开（公告）号： | CN110669774A | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 郑宏臣;宋诙;徐健勇;甄杰;付晓平 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/56 | 分类号： | C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种β‑甘露聚糖酶密码子优化序列及提高毕赤酵母工程菌表达水平的方法。本发明为提高耐热酸性β‑甘露聚糖酶Man5AS11R在毕赤酵母工程菌中的诱导表达量，首先应用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对man5AS11R基因的核苷酸序列进行密码子偏向性优化，通过pPIC9k‑man5AS11R‑opt重组载体，成功构建了毕赤酵母工程菌GS115/man5AS11R‑opt。在此基础上，通过重组载体pPICZ‑αA‑vgb在菌株GS115/man5AS11R‑opt中完成了血红蛋白VHb的共表达，显著促进了毕赤酵母工程菌发酵过程中的溶氧水平，提高了该工程菌发酵密度和产量，10L发酵罐发酵产酶达到20000U/mL以上，较原始菌株GS115/man5AS11R产量提高了一倍，显示了良好的产业化生产前景。 | ||
| 搜索关键词： | 毕赤酵母工程菌 甘露聚糖酶 重组载体 血红蛋白 密码子优化序列 密码子偏向性 生物技术领域 产业化生产 发酵罐发酵 核苷酸序列 表达水平 发酵过程 溶氧水平 诱导表达 原始菌株 工程菌 共表达 耐热 产酶 构建 菌株 发酵 基因 应用 优化 成功 | ||
【主权项】：
1.一种耐热酸性β-甘露聚糖酶Man5AS11R针对毕赤酵母宿主菌的密码子优化序列，其特征在于，其序列如SEQ ID NO.1所示。/n
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