[发明专利]一种人参皂苷Rg1自体脂肪干细胞体外培养方法在审
申请号: | 201810711725.X | 申请日: | 2018-07-03 |
公开(公告)号: | CN108949676A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 蔡国辉;高守泉 | 申请(专利权)人: | 湖南未名三胞转化医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410007 湖南省*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明提供一种人参皂苷Rg1自体脂肪干细胞体外培养方法,包括如下步骤:取人腹部脂肪组织;利用I型胶原酶对所述人腹部脂肪组织进行消化,得到消化组织;对所述消化组织进行原代细胞分离和接种培养,得到干细胞;取所述干细胞加入至诱导培养基中,进行传代培养;其中,培养基中包括人参皂苷Rg1;在6‑8天经胰蛋白酶消化,进行二次传代培养;取第三代脂肪间充质干细胞进行培养,收获人参皂苷Rg1自体脂肪干细胞。本发明所提供的方法所制备人参皂苷Rg1自体脂肪干细胞可大大提高干细胞的增殖率,分化能力强。 | ||
搜索关键词: | 人参皂苷 干细胞 自体脂肪 腹部脂肪组织 细胞体外培养 传代培养 消化 脂肪间充质干细胞 胰蛋白酶消化 诱导培养基 分化能力 接种培养 原代细胞 培养基 第三代 制备 收获 | ||
【主权项】:
1.一种人参皂苷Rg1自体脂肪干细胞体外培养方法,其特征在于,包括:取人腹部脂肪组织;利用I型胶原酶对所述人腹部脂肪组织进行消化,得到消化组织;对所述消化组织进行原代细胞分离和接种培养,得到干细胞;取所述干细胞加入至诱导培养基中,进行传代培养;并且,对传代培养的培养液24小时后换液1次,以后每3天换液1次;其中,所述培养基中包括人参皂苷Rg1;在6‑8天细胞生长融合达到第一预设百分率时,经胰蛋白酶消化,进行二次传代培养;取经过二次传代培养的第三代脂肪间充质干细胞进行培养,在生长至培养瓶底的第二预设百分率的面积时,收获人参皂苷Rg1自体脂肪干细胞。
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