[发明专利]一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法有效
| 申请号： | 201810712312.3 | 申请日： | 2018-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN108611327B | 公开（公告）日： | 2022-03-18 |
| 发明（设计）人： | 吕红;周峻岗;段进坤;杨德强 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司： | 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 | 代理人： | 郁旦蓉 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 为解决猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化中的步骤复杂、工艺繁琐、生产成本高、纯化效率低等问题，本发明提供了一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，包括如下步骤：步骤S1，收集重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对细胞裂解液进行澄清获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对病毒样颗粒初提液进行离子交换层析获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液均含有预定浓度的表面活性剂。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 圆环 病毒 颗粒 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，用于从重组酵母细胞裂解液中分离纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1，收集表达猪圆环病毒2型病毒样颗粒的重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对所述细胞裂解液进行澄清，获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对所述病毒样颗粒初提液进行离子交换层析，获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对所述病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩3～5倍，获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对所述病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的所述离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液均含有预定浓度的表面活性剂。
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