[发明专利]一种稳定表达人源CaSR基因的细胞模型及其构建方法在审

专利信息
申请号: 201810715685.6 申请日: 2018-06-29
公开(公告)号: CN110656088A 公开(公告)日: 2020-01-07
发明(设计)人: 刘剑峰;殷学梁;汤恒敏;王素云 申请(专利权)人: 华中科技大学
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/85;C12Q1/02
代理公司: 42201 华中科技大学专利中心 代理人: 夏惠忠
地址: 430074 湖北*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明提供了一种稳定表达人源CaSR(钙敏感受体)基因的细胞模型,保藏在中国典型培养物保藏中心,命名为中国仓鼠卵巢细胞CHO‑CaSR,保藏编号为CCTCC NO:C201893,其构建方法是,将SNAP标签与CaSR基因通过连接序列cacgcgt相连,得到融合有SNAP标签的CaSR基因,将其与表达载体连接构建含有CaSR基因的重组质粒,将重组质粒转染哺乳动物细胞,经药物筛选培养成能稳定表达CaSR基因的细胞株。该细胞模型既可用于筛选以CaSR为靶点的活性物质,又可通过SNAP‑tag与均相时间分辨荧光技术(HTRF)联合应用,准确快速研究CaSR与其它蛋白的相互作用及其寡聚化。该细胞模型能够高通量、低成本的筛选以CaSR为靶点的活性物质,筛选方法步骤简单可控,成本低,通量高,具有很好的稳定性和可靠性。
搜索关键词: 保藏 细胞模型 基因 活性物质 稳定表达 筛选 靶点 构建 标签 时间分辨荧光技术 中国仓鼠卵巢细胞 中国典型培养物 哺乳动物细胞 重组质粒转染 钙敏感受体 表达载体 联合应用 连接序列 药物筛选 重组质粒 低成本 高通量 寡聚化 细胞株 可控 可用 人源 通量 蛋白 融合 研究
【主权项】:
1.一种表达人源CaSR基因的细胞模型,其特征在于,它是中国仓鼠卵巢细胞CHO-CaSR,已于2018年5月11日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C201893,保藏地址为中国武汉,武汉大学。/n
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