[发明专利]一种小体系连续快速测定海水溶解性铵盐的方法

摘要

本发明公开了一种小体系快速测定水体铵盐的方法。本发明设计了1ml的反应体系，通过优化1ml反应体系中各溶液用量，以及反应时间，使得体系的稳定性好，还原率高，本发明操作简单、耗时少、需要样品量少等，解决了常规水体硝酸盐测定方法使用样品量多、耗时长、过程繁琐等问题，是一种在海上简单、准确、实时测定水体微量硝酸盐的方法。

主权项

1.一种小体系连续快速测定海水溶解性铵盐的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、标准工作曲线的制定：在两组各六个圆底旋盖2mL离心管中分别移入0.1μmol/L氯化铵标准溶液0、10、20、40、60、80μL,用超纯水稀释至1mL,混匀；加入100μL 50mg/mL次溴酸钠氧化剂溶液,混匀,反应30min；加入100μL 10g/L对氨基苯磺酰胺溶液,混匀,放置5min；加入20μL1g/L1‑奈替乙二胺二盐酸溶液溶液,充分混匀,放置15min后即可测定,颜色可稳定4h；颜色稳定后,吸取300μL待测溶液至标准平底96孔酶标板中,放置酶标仪内在543nm波长下测定各个样品吸光值(As),记录测定值；An＝As‑Ab，其中Ab为空白吸光值，An为扣除空白后的吸光值，以An为纵坐标，铵盐‑氮的浓度Cs为横坐标绘制标准工作曲线，并用线性回归法求出标准工作曲线截距a和斜率b；求出其回归直线方程；B、水样测定：取离心后的水体样品1ml，加入到圆底旋盖2mL离心管中，再加入100μL 50mg/mL次溴酸钠氧化剂溶液,混匀,反应30min；加入100μL10g/L对氨基苯磺酰胺溶液,混匀,放置5min；加入20μL 1g/L 1‑奈替乙二胺二盐酸溶液,充分混匀,放置15min后即可测定,颜色可稳定4h；颜色稳定后,吸取300μL待测溶液至标准平底96孔酶标板中,放置酶标仪内在543nm波长下测定水体样品吸光值，该吸光值减去参比空白吸光值即为待测水样的吸光值Aw；C、铵盐氧化率测定各量取1.0ml盐度为5.0的人工海水和用盐度为5.0的人工海水配制含有1.0、5.0μmol/L氯化铵溶液，分别加入到圆底旋盖2mL离心管中，再分别加入100μL 50mg/mL次溴酸钠氧化剂溶液,混匀,反应30min；加入100μL10g/L对氨基苯磺酰胺溶液,混匀,放置5min；加入20μL1g/L 1‑奈替乙二胺二盐酸溶液，充分混匀,放置15min后即可测定,颜色可稳定4h；颜色稳定后,吸取300μL待测溶液至标准平底96孔酶标板中,放置酶标仪内在543nm波长下测定水体样品吸光值，其中A_b1、A_b2为1.0、5.0μmol/L铵盐溶液的吸光值(已扣除试剂空白)，和分别为含有1.0、5.0μmol/L亚硝酸盐溶液的吸光值(已扣除试剂空白)；D、铵盐氧化率的计算按照下式计算铵盐氧化率R：公式中对应的字母代号如下表所示：Abn——为含有1.0或者5.0μmol/L铵盐溶液的吸光值；——为1.0或者5.0μmol/L亚硝酸盐溶液的吸光值。E、计算水样中铵盐‑氮浓度按照下式计算：式中：c(NH4+)——水样中氨盐浓度，单位为μmol/L；——水样测得的平均吸光值；Ab——样品空白吸光值；a——标准工作曲线截距；b——标准工作曲线斜率。