[发明专利]具热稳定性和群体感应淬灭活性菌株ZD03的筛选和培养方法在审
| 申请号： | 201810718389.1 | 申请日： | 2018-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN109055226A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 丁贤;段亚飞;殷波;李来好;胡瑞萍 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院南海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12N1/20;C12Q1/04;C12R1/125 |
| 代理公司： | 广州专理知识产权代理事务所(普通合伙) 44493 | 代理人： | 谭昉 |
| 地址： | 510300 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及微生物筛选培养技术领域，尤其涉及具热稳定性和群体感应淬灭活性菌株ZD03的筛选和培养方法。本发明筛选出具热稳定性和群体感应淬灭活性菌株ZD03，作为养殖生态环境中存在具有抑制细菌群体感应活性的微生物，有利于微生物资源开发；利用响应面方法优化菌株ZD03的发酵培养参数，建立了发酵培养的拟合数学模型，得到优化培养基配方，提高生产效率，为其产业化应用提供数据支撑，理论意义和实际意义十分重大。 | ||
| 搜索关键词： | 群体感应 活性菌株 热稳定性 淬灭 发酵培养 筛选 优化培养基配方 产业化应用 微生物筛选 微生物资源 理论意义 生产效率 生态环境 数据支撑 数学模型 抑制细菌 优化菌株 响应面 拟合 微生物 养殖 开发 | ||
【主权项】：
1.具热稳定性和群体感应淬灭活性菌株ZD03的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，菌株分离纯化，从养殖生态环境中取实验样品，稀释后涂布于2216E 平板，30℃ 培养2‑3 d后挑取单菌落，多次划线分离纯化, 然后接于斜面,得到纯化菌株ZD03；步骤二，群体感应淬灭活性检测，将涂有X‑gal的MM培养基平板切成条状,在细条一侧加入步骤一得到的纯化菌株ZD03与AHLs混合物,在另一侧依次加指示菌WCF47，30 ℃培养18 h后，观察实验结果，挑取指示菌菌落为白色的纯化菌株ZD03，得到具群体感应淬灭活性菌株ZD03；步骤三，热稳定性筛选，将步骤二得到的具群体感应淬灭活性菌株ZD03接至装有50ｍＬ无菌水的三角锥型瓶中摇匀，再将菌液分别80 ℃水浴10 Min，然后平皿涂布培养2‑3d，挑取单菌落，得到具热稳定性和群体感应淬灭活性菌株ZD03。
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