[发明专利]一种用酶标仪酶法定量检测液态奶中乳果糖的方法及其试剂盒有效
| 申请号： | 201810720180.9 | 申请日： | 2018-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN108982829B | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 郑楠;文芳;李松励;李慧颖;张养东;赵圣国;王加启 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53;G01N33/535 |
| 代理公司： | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人： | 刘元霞;牛艳玲 |
| 地址： | 100193 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种酶标仪酶法定量检测乳果糖的方法及其试剂盒。本发明采用果糖建立标准曲线，解决了酶标仪检测中无法定量的技术问题，使检测方法因采用酶标仪而极大的提高的检测效率，降低了检测试剂用量。另一方面，本发明通过将葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶，NADP+与ATP分别按一定比例混合后进行冻干，将己糖激酶和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶混合后制成悬浮液的处理方法进行检测试剂的制备，不仅不干扰检测反应及其效果，还减少了试剂添加步骤，简化了操作，提高了检测的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 酶标仪 检测 定量检测 检测试剂 乳果糖 试剂盒 酶法 葡萄糖氧化酶 葡萄糖 过氧化氢酶 磷酸脱氢酶 标准曲线 干扰检测 己糖激酶 试剂添加 悬浮液 液态奶 冻干 果糖 制备 | ||
【主权项】：
1.一种酶标仪酶法定量检测液态奶中乳果糖的方法，其包括如下步骤：以果糖为标准品建立标准曲线，所述标准曲线的建立步骤包括：在酶标仪用微孔板中加入果糖标准品溶液，使每孔中果糖质量依次呈等差增长或呈倍数增长，加入NADP+和ATP后混匀；再加入己糖激酶和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶混匀后反应，在酶标仪上340nm处读取溶液OD值，记为A1，再加入磷酸葡萄糖异构酶混匀后反应，在酶标仪上340nm读取溶液OD值，记为A2；以(A2‑A1)的值为净OD值，作为纵坐标，以每孔中果糖质量为横坐标，绘制标准曲线或计算回归方程。
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