[发明专利]一种火棘籽多肽及其制备方法在审
申请号: | 201810727283.8 | 申请日: | 2018-07-05 |
公开(公告)号: | CN108977485A | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 金文闻;余龙江;余元涛;敖明章;赵春芳;刘瑶瑶 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 许恒恒;李智 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种火棘籽多肽及其制备方法,该制备方法包括:(1)将火棘籽原料加入纯净水中进行组织细胞破碎得到火棘籽匀浆液;接着将匀浆液投入超声辅助提取罐,添加酶制剂,进行逆流循环浸提,离心去渣得离心提取液,真空浓缩得到浓缩浸膏;(2)向浓缩浸膏中加入纯净水,调pH至中性,添加中性蛋白酶进行水解,然后灭酶、冷却,离心取上层清液得到火棘籽酶解液;(3)将酶解液分别经过超滤和纳滤处理得到目标截留酶解液,然后40~60℃减压浓缩至浸膏,真空冷冻干燥后粉碎即可制得火棘籽多肽。本发明通过对制备方法整体的工艺流程设计进行改进,采用两步酶解法对火棘籽进行处理,与现有技术相比能够有效解决火棘籽多肽的制备问题。 | ||
搜索关键词: | 火棘 制备 多肽 酶解液 纯净水 匀浆液 浓缩 超声辅助提取 工艺流程设计 真空冷冻干燥 两步酶解法 中性蛋白酶 离心提取 纳滤处理 逆流循环 上层清液 有效解决 真空浓缩 组织细胞 酶制剂 超滤 浸提 灭酶 去渣 水解 冷却 破碎 截留 改进 | ||
【主权项】:
1.一种火棘籽多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将火棘籽原料清洗后,加入至重量为该火棘籽原料重量1~3倍的40~60℃的纯净水中,然后在高压均质机中进行组织细胞破碎得到火棘籽匀浆液;接着,将所述火棘籽匀浆液投入可温控的超声辅助提取罐,添加纯净水,调节pH值至3~7,并使底物质量浓度为5~15%,然后添加酶制剂,所述酶制剂的添加量为所述火棘籽重量的0.2~3%,接着进行逆流循环浸提,浸提温度控制在35~65℃,然后再离心去渣得离心提取液,真空浓缩,得到浓缩浸膏;所述酶制剂为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶中的一种或多种;(2)向所述步骤(1)得到的所述浓缩浸膏中加入6~10倍重量的纯净水,用碱液调pH至6.8~7.2,按底物质量浓度0.5~5%添加中性蛋白酶进行水解,水解温度为30~60℃;水解处理完毕后升温至90~100℃灭酶,接着冷却,然后离心取上层清液,得到火棘籽酶解液;(3)将所述步骤(2)得到的所述火棘籽酶解液经过截留分子量为4000~8000Da的超滤膜进行过滤,除去大分子杂质,得超滤膜透过液,接着,再将该超滤膜透过液经过截留分子量为150~1000Da的纳滤膜进行过滤,除去部分残留无机盐和小分子杂质,得目标截留酶解液,然后40~60℃减压浓缩至浸膏,真空冷冻干燥后粉碎即可制得火棘籽多肽。
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