[发明专利]一种快速观察翠竹胚囊结构的方法在审
| 申请号： | 201810735099.8 | 申请日： | 2018-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN108872174A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 林树燕;范婷婷;王星;傅华君;万雅雯;苏佳露;杨雅运;丁雨龙 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速观察翠竹胚囊结构的方法，包括取样→染色→透明→观察等步骤。本发明利用整体染色透明激光共聚焦显微技术，快速观察翠竹胚囊发育，先将翠竹的子房在水杨酸甲酯中透明后，以便观察到包藏在其中的胚囊，再用激光扫描共聚焦显微镜对翠竹子房各层分别成像，获得胚囊内部清晰的荧光图像，建立胚囊整体结构概念，明确翠竹胚囊发育过程和发育类型，是一种方便快速的竹类植物胚囊结构观察技术，具有观察省时，操作简便，结构清晰等优势，有效解决了竹类植物子房胚囊在发育过程中难以观察到整体结构的问题，为建立和丰富完善竹类植物生殖生物学理论奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 胚囊 观察 子房 胚囊结构 竹类植物 发育过程 激光扫描共聚焦显微镜 发育 生殖生物学 水杨酸甲酯 透明激光 显微技术 荧光图像 有效解决 整体染色 包藏 透明 共聚焦 清晰 染色 取样 省时 成像 | ||
【主权项】：
1.一种快速观察翠竹胚囊结构的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取不同发育时期的小穗，固定后，转移至酒精中永久保存；2)梯度复水后，曙红溶液染色，蒸馏水水洗，再以梯度酒精脱水，无水乙醇中重复数次；3)将染色好的子房置于水杨酸甲酯和酒精的混合液中过渡，随后转移到纯水杨酸甲酯溶液中透明，最后将样品保存于纯水杨酸甲酯中；4)将样品置于凹玻片之上，在凹玻片上加少许的水杨酸以及中性树脂，用以封片；在激光扫描共聚焦显微镜下进行分层扫描并获取图像，观察出翠竹胚囊结构。
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