[发明专利]快速检测药材中的黄曲霉毒素的方法和所用的试纸卡

摘要

本发明涉及快速检测药材中的黄曲霉毒素的方法和所用的试纸卡。该方法包括如下步骤：提供用于检测黄曲霉毒素的胶体金试纸卡；样品用乙腈溶液提取，过NH2/C18柱净化样品，过C18柱二次净化样品测定：移取样品提取液，点于胶体金试纸卡上，在45℃条件下恒温孵育，用读数仪对检测条进行读数测定，并根据上样量和样品稀释倍数计算药材中的黄曲霉毒素含量。本发明方法可以在5分钟检测出结果，这种方法可以准确定量检测各种根及根茎类中药材。本发明所提供的试纸卡具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、检测结果准确、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。此外，本发明方法回收率高、检测结果可以长时间保存。

主权项

1.检测药材中黄曲霉毒素的方法，该方法包括如下步骤：(1)提供用于检测黄曲霉毒素的胶体金试纸卡；(2)样品提取：(2a)取待检药材或其饮片的粉末2克重量份，放入样品管中，加入4～8毫升体积份(例如6毫升体积份)的80～90％(例如85％)乙腈溶液至样品中，涡旋提取1～3分钟；静置1分钟后2000‑5000rpm(例如3000‑4000rpm)离心3～8分钟(例如5min)，移取2毫升体积份上清液至NH2/C18柱，过柱净化样品上清液，收集至干净试管；(2b)移取3毫升体积份甲醇至NH2/C18柱，安装注射器装配，过柱弃去；移取3毫升体积份去离子水或蒸馏水至C18柱，安装注射器装配，过柱弃去，得经清洗的C18柱；(2c)移取1.5毫升体积份步骤(2a)所得净化后的样品上清液至15毫升体积份离心管中，用10毫升体积份去离子水或蒸馏水稀释，混合；移取稀释样品至注射器，过NH2/C18柱，过柱液体弃去；加5毫升体积份去离子水或蒸馏水至离心管中，用于冲洗，转移至注射器，过柱弃去；用注射器或洗耳球按压C18柱顶部，使残留液体过柱，弃去废液；(2d)移取1毫升体积份甲醇至经步骤(2c)处理的NH2/C18柱，过柱并收集二次净化样液至小离心管；移取100微升体积份二次净化样液，加入至提前准备的小离心管(内含1ml磷酸盐缓冲液)中，加盖，混合，作为提取液样品，待检；(3)样品测定：移取步骤(2)所得提取液样品100～300μl，点于胶体金试纸卡上(样品垫部位)，在45℃条件下恒温孵育4‑6分钟，用读数仪对检测条进行读数测定，并根据上样量和样品稀释倍数计算药材中的黄曲霉毒素含量。