[发明专利]一种茶树鲜叶茸毛的提取方法及其应用

摘要

本发明提供了一种快速提取茶树鲜叶茸毛的方法及其应用，具体步骤如下：（1）取带茸毛的茶树芽或叶片等鲜嫩组织，自然放入50ml离心管，在液氮中快速冷冻；（2）手握冷冻后的离心管样品在旋涡混合器上连续振动20s~30s，使样品表面的茸毛摩擦脱落并附着在管壁和管底上；（3）用液氮冷冻过的药匙迅速将附着于管壁和管底上的茸毛刮下，放入液氮冷冻的离心管中保存，重复数次，直至收集到所需量的茸毛。本方法提取出的茸毛样品，最大程度上保持了样品的新鲜，提取出的茸毛能够用于RNA提取，可以用于分子生物学研究和代谢物分析，为茶树茸毛的研究奠定基础。

主权项

1.一种茶树鲜叶茸毛的提取方法，其特征在于，具体包括如下步骤：（1）取单芽、一芽一叶、一芽二叶和一芽三叶的茶树鲜叶，取下含茸毛的叶片和芽组织，自然舒展装入50ml离心管中，样品体积不超过离心管体积的2/3，拧紧离心管盖子，放入液氮中快速冷冻50s~150s；（2）迅速从液氮中取出步骤（1）的装样品的离心管，用手握住置于旋涡混合器上连续振动20s~30s，通过振动作用将茸毛抖动脱落，脱落后的茸毛将黏于管壁和管底上；（3）另取一个离心管放入液氮中冷冻，快速拧开步骤（2）的离心管盖子，用液氮冷冻过的药匙迅速刮下黏在管壁上的茸毛，将茸毛转入液氮冷冻着的离心管中，倒掉提取过的样品，再用药匙将管底的茸毛取出，迅速放入装茸毛的冷冻离心管中；（4）将提取到的茸毛样品放入‑80℃超低温冰箱保存。