[发明专利]一种甜椒核雄性不育两用系的选育方法

摘要

本发明公开了一种甜椒核雄性不育两用系的选育方法，利用分子标记技术对甜椒核雄性不育两用系AB91的不育基因(msms)和可育基因(MSMS)进行标记，在甜椒核雄性不育两用系转育的F2代育性发生分离时，在苗期利用分子标记辅助选择对不育株和可育株进行鉴定，淘汰基因型为MSMS的可育株，筛选出基因型为MSms的可育株，直接用于不育系的转育。本发明在苗期利用分子标记辅助选择，简化转育程序，提高育种效率，建立更加简便的甜椒核雄性不育转育技术，减少大量的繁琐工作，节省人力、物力、财力，降低了育种成本。

主权项

1.一种甜椒核雄性不育两用系的选育方法，其特征在于，包括以下操作：1)以甜椒核雄性不育两用系AB91群体内的不育株为母本，其雄性不育性由一对隐性核基因msms控制；以具有显性基因MSMS的甜椒自交系为父本，进行杂交后获得杂交种F1代；2)种植杂交种F1代，F1代表现全可育，可育株基因型为MSms，可育株自交留种，得到自交种F2代；3)将自交种F2代播种在育苗穴盘中，F2代育性开始分离，其群体内有不育株和可育株，可育株有两种基因型MSMS和MSms；4)在F2代幼苗长到4‑5片叶大小时，每个单株分别编号，分别取嫩叶提取DNA并编号；以P1、P2作为引物对提取的甜椒幼苗叶片DNA进行PCR扩增，扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测并银染；其中，前端引物P1为：TAAAACACGGGATGCAGCTACTA；后端引物P2为：AAGTTCCTTTTCGTGTAACGACC；电泳结果中扩增出片段大小为75bp特异性条带的单株为不育株，其基因型为msms；扩增出片段大小为150bp特异性条带的单株为纯显性可育株，基因型为MSMS；扩增出片段大小分别为75bp和150bp特异性条带的单株为杂合基因可育株，基因型为MSms；在苗期淘汰纯显性可育株，保留不育株和杂合基因可育株；5)将保留的不育株和杂合基因可育株分别定植在网纱棚内，开花期淘汰农艺性状不良的不育株和可育株，分别选择符合育种目标性状的不育株与可育株成对测交，从不育株上收获测交组合种子，不同组合分别编号；6)在网纱棚内分别种植不同测交组合，其育性表现分离，可育株与不育株分离比例符合1：1；淘汰农艺性状不良的测交组合，在符合育种目标性状的测交组合内，选择符合育种目标性状的不育株与可育株成对姊妹交；采种时，根据父本、母本性状淘农艺性状不良及不符合育种目标性状的姊妹交组合，选择符合育种目标性状的姊妹交组合留种、分别编号；7)将符合育种目标性状的姊妹交组合分别种植在网纱棚内，在这些姊妹交组合内，继续进行姊妹交，在保持后代育性分离比例均符合1：1的同时，对农艺性状进行淘汰、选择，连续3代姊妹交，得到符合育种目标性状的新的甜椒核雄性不育两用系。