[发明专利]从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法

摘要

本发明公开了一种从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法，将多穗石柯叶片进行研磨，得到叶片粉末；将叶片粉末与乙醇水溶液混合均匀，再放入索氏提取器中，回流提取得到第一提取液，将第一提取液进行过滤，得到滤渣和第一提取液滤液，在滤渣中加入乙醇水溶液，再放入索氏提取器中，回流提取得到第二提取液，将第一提取液滤液和第二提取液混合，得到提取液，浓缩提取液，再冷冻干燥得到干粉；将干粉在第一层析柱中静态吸附，在第二层析柱中静态吸附，用乙醇水溶液对第二层析柱进行冲洗，得到第二洗脱液后进行蒸发，得到根皮苷干粉，本发明方法采用回流提取有机溶剂提取根皮苷的方式，大大缩短了有机溶剂浸提的时间，降低了后期纯化的难度。

主权项

1.一种从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将多穗石柯叶片进行研磨，过100～200目筛，得到叶片粉末；2)回流提取：将M1g叶片粉末与V1mL且乙醇体积浓度为70～80％的乙醇水溶液混合均匀，再放入索氏提取器中，回流提取至少4h后得到第一提取液，将第一提取液进行过滤，得到M2g滤渣和第一提取液滤液，在M2g滤渣中加入V2mL且乙醇体积浓度为70～80％的乙醇水溶液，再放入索氏提取器中，回流提取至少4h后得到第二提取液，其中，M1：V1＝1:(10～20)，M2：V2＝1:(10～20)；3)冷冻干燥：将步骤2)所得第一提取液滤液和第二提取液混合，得到提取液，浓缩所述提取液，直至除去提取液中的乙醇，再冷冻干燥得到M3mg干粉；4)吸附：用乙醇体积浓度为80～95％的乙醇水溶液浸泡聚酰胺12～15h后，将聚酰胺取出并使用去离子水洗至排出的清洗液为中性，再用15～20wt％的氢氧化钠水溶液浸泡聚酰胺至少8h，将聚酰胺取出后用去离子水冲洗至排出的清洗液为中性；然后再用体积浓度为15～20％的盐酸溶液浸泡聚酰胺至少8h，取出聚酰胺后用去离子水冲洗至排出的清洗液为中性，将聚酰胺灌注到第一层析柱中，在第一层析柱中加入去离子水冲洗至该第一层析柱流出液无白色浑浊为止，将步骤3)得到的M3mg干粉用30～45℃的温水均匀分散成干粉浓度为30～80mg/mL的干粉液体，将干粉液体加入第一层析柱中静态吸附30～50min，其中，灌注到第一层析柱中聚酰胺所占该第一层析柱的体积为V3mL，M3：V3＝(35‑90)：1；5)除杂质：用蒸馏水对步骤4)所得第一层析柱进行冲洗至洗脱液澄清；6)解吸：用乙醇体积浓度为X的乙醇水溶液，以2～5mL/min的流速洗脱第一层析柱，得到第一洗脱液，将第一洗脱液蒸发至乙醇挥发，得到浓缩液体；7)吸附：用15～20wt％的氢氧化钠水溶液浸泡大孔树脂至少8h，取出大孔树脂后再用去离子水冲洗至排出的清洗液为中性，然后用15～20wt％盐酸溶液浸泡大孔树脂至少8h，取出大孔树脂，用去离子水冲洗大孔树脂直至排出的清洗液为中性，再用无水乙醇浸泡大孔树脂至少12h，取出大孔树脂，将大孔树脂灌注在第二层析柱中，在第二层析柱中加入去离子水冲洗至流出液无白色浑浊为止，将步骤7)所得浓缩液体加入第二层析柱中静态吸附30～50min，其中，灌注到第二层析柱中大孔树脂所占该第二层析柱的体积为V4mL，V3：V4＝1：(0.75‑1.25)；8)解吸：用乙醇体积浓度为X的乙醇水溶液以2～3mL/min的流速对第二层析柱进行冲洗，得到第二洗脱液；9)冷冻干燥：将步骤8)所得第二洗脱液进行蒸发，以去除其中乙醇，再冷冻干燥，得到根皮苷干粉，其中，所述X为70～90％。