[发明专利]人胎盘羊膜、蜕膜组织的制备冻存方法和应用有效
| 申请号： | 201810787878.2 | 申请日： | 2018-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN108812640B | 公开（公告）日： | 2021-11-26 |
| 发明（设计）人： | 徐峰波;王肇光;金华;崔光晶;宋现收;生德伟;李德柱 | 申请（专利权）人： | 银丰生物工程集团有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02;C12N5/073 |
| 代理公司： | 山东舜天律师事务所 37226 | 代理人： | 李新海 |
| 地址： | 250101 山东省济南*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了人胎盘羊膜、蜕膜组织的制备冻存方法，包括：(1)将胎盘洗净；沿胎盘边缘剪下已脱落的蜕膜，并将羊膜分割成组织片儿，然后，将胎盘胎儿面的羊膜从其附着的胎盘组织上取下；(2)用生理盐水或PBS缓冲液清洗羊膜、蜕膜，将羊膜、蜕膜折叠或者平铺放入冻存袋或冻存管中，加入4℃的冻存液，密封，转入程序降温仪，按照设定的降温程序降温至‑80℃，转移至液氮冷冻保存。本发明的冷冻保存方法，有利于提高冻存组织和细胞的活性，复苏后形态、功能、结构与新鲜组织一致，组织内细胞总体存活率达90％以上，所保存的组织不但可以用于分离干细胞，上皮细胞等领域，还可以用于组织工程移植等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 胎盘 羊膜 组织 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种人胎盘羊膜、蜕膜组织的制备冻存方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)将胎盘洗净；沿胎盘边缘剪下已脱落的蜕膜，并将羊膜分割成组织片儿，然后，将胎盘胎儿面的羊膜从其附着的胎盘组织上取下；(2)清洗羊膜、蜕膜，将羊膜、蜕膜折叠或者平铺放入冻存袋或冻存管中，加入冻存液，密封，转入程序降温仪，按照设定的降温程序降温至‑80℃，转移至液氮冷冻保存；所述降温程序为：在4℃保持5min；以2℃/min速率继续降至‑10℃，保持10min；以1℃/min速率继续降至‑40℃保持5min；以0.5℃/min速率继续降至‑80℃保持5min；所述冻存液，由质量浓度为20％的人血白蛋白溶液、二甲基亚砜、丙二醇、羟乙基脲和海藻糖组成，其中，各组分所占比例为：二甲基亚砜5～10wt％，丙二醇5～10wt％，羟乙基脲5～10wt％，海藻糖5～10wt％，余量为人血白蛋白溶液。
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