[发明专利]一种鸭TLR2胞外区多克隆抗体及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201810803633.4 | 申请日： | 2018-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN108864282A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 朱春红;李慧芳;陶志云;徐文娟;宋卫涛;刘宏祥;章双杰 | 申请（专利权）人： | 江苏省家禽科学研究所 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C07K16/06;C07K14/47;C12N15/12;C12N15/70;A61K39/395;A61K47/68;A61P37/00 |
| 代理公司： | 北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人： | 张亦华 |
| 地址： | 225125 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鸭TLR2胞外区多克隆抗体及其制备方法与应用，该方法包括以下步骤：(1)人工合成TLR2胞外区序列；(2)将TLR2胞外区序列构建至表达载体pET28a，筛选后得到重组质粒pET28a‑TLR2；(3)将重组质粒pET28a‑TLR2转化到大肠杆菌BL21，在大肠杆菌BL21中表达TLR2‑His重组蛋白；(4)将TLR2‑His重组蛋白免疫家兔，分离免疫家兔血清，即得。本发明制备的多克隆抗体的血清效价超过1:50000，具有特异性好、纯度高的特点，能特异性的检测到重组蛋白和组织内源性TLR2，制得的多克隆抗体为进一步研究TLR2的生物学功能提供有利的条件。 | ||
| 搜索关键词： | 多克隆抗体 制备 大肠杆菌 胞外区序列 重组蛋白 重组质粒 胞外区 重组蛋白免疫 生物学功能 表达载体 免疫家兔 血清效价 内源性 血清 构建 应用 筛选 检测 转化 研究 | ||
【主权项】：
1.一种鸭TLR2胞外区多克隆抗体的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)根据TLR2的胞外区域的氨基酸序列，合成TLR2胞外区核酸序列，以该序列为模板扩增TLR2胞外区序列；(2)将扩增得到的TLR2胞外区序列构建至表达载体pET28a，筛选含有目的片段的阳性克隆，得到重组质粒pET28a‑TLR2；(3)将重组质粒pET28a‑TLR2转化到大肠杆菌BL21，在大肠杆菌BL21中表达TLR2‑His重组蛋白；(4)将TLR2‑His重组蛋白免疫家兔，分离免疫家兔血清，得到所述鸭TLR2胞外区多克隆抗体。
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